检测项目
1.组织病理学检查:表皮内中性粒细胞性脓疱形成(直径≥100μm)、海绵状水肿程度(分级0-3级)、真皮浅层淋巴细胞浸润密度(细胞数/mm)
2.免疫组化分析:IL-36受体拮抗剂(IL-36RN)蛋白表达水平(阳性率≤30%为异常)、TNF-α染色强度(H-score≥200)
3.微生物培养鉴定:需氧菌培养(菌落数≥10⁵CFU/g)、真菌镜检阳性率(KOH湿片法≥3次重复)
4.血液生化指标:白细胞计数(≥1210⁹/L)、C反应蛋白(CRP≥50mg/L)、降钙素原(PCT≥0.5ng/mL)
5.分子生物学检测:IL36RN基因外显子测序(c.115+6T>C突变频率≥95%)、Sanger测序验证(覆盖度≥100)
检测范围
1.皮肤活检组织样本:直径≥4mm的穿刺标本或手术切除样本
2.外周静脉血样本:EDTA抗凝全血3mL+血清分离管5mL
3.脓液分泌物:无菌拭子采集量≥0.5mL
4.基因检测样本:口腔黏膜拭子或全血基因组DNA(浓度≥50ng/μL)
5.药物敏感性测试样本:分离菌株纯培养物(菌悬液浓度0.5麦氏单位)
检测方法
1.组织病理学诊断:ISO15189:2012医学实验室质量体系规范;GB/T22576-2021医学实验室能力验证要求
2.免疫组化染色:GB/T37864-2019免疫组织化学试剂盒性能评价标准;CAP实验室认证方案
3.微生物培养:CLSIM45-A3苛养菌药敏试验标准;GB4789.15-2016真菌计数法
4.PCR测序分析:ISO/IEC17025基因扩增实验室技术要求;GB/T30989-2014核酸定量方法
5.药物敏感试验:EUCAST13.0版折点标准;GB/T20470-2006临床微生物药敏试验指南
检测设备
1.LeicaRM2235全自动轮转式切片机:制备4μm厚连续组织切片
2.ABI7500荧光定量PCR仪:IL36RN基因突变位点扩增(灵敏度≤1%)
3.RocheCobasc702全自动生化分析仪:CRP/PCT定量检测(CV≤3%)
4.ThermoScientificHeracell150iCO₂培养箱:细菌/真菌标准化培养(温度波动0.5℃)
5.IlluminaMiSeq基因测序仪:全外显子组测序(读长2300bp)
6.HamamatsuNanoZoomerS360数字病理扫描系统:20倍物镜全片扫描(分辨率0.23μm/pixel)
7.BDFACSCantoII流式细胞仪:炎性细胞亚群分析(8色荧光通道)
8.DakoOmnis全自动免疫组化染色机:批量处理60张切片/批次
9.SiemensAtellicaIM1600电化学发光分析仪:IL-6/IL-8细胞因子定量(LOD≤0.5pg/mL)
10.HaierDW-86L338超低温冰箱:生物样本长期保存(-86℃3℃恒温)