检测项目
1.反向重复序列长度:检测范围20-500bp,分辨率1bp
2.回文对称性指数:计算对称轴两侧碱基匹配度(0-100%)
3.热力学稳定性:测定ΔG值(-50至0kcal/mol),精度0.5kcal/mol
4.发夹环结构参数:环区长度4-20nt,茎区配对率≥85%
5.同源重组概率:预测重组效率(0.01-99.99%),置信区间95%
检测范围
1.基因组DNA:包括人类/动物/植物全基因组提取物
2.质粒载体:各类原核/真核表达载体及克隆载体
3.合成寡核苷酸:长度≤200nt的单链/双链DNA片段
4.PCR产物:扩增产物纯度≥90%,浓度≥10ng/μL
5.病毒基因组:腺相关病毒(AAV)、慢病毒载体等
检测方法
1.ISO21571:2013食品微生物学-核酸提取与纯化
2.ASTME3025-16DNA测序质量评价标准
3.GB/T30989-2014高通量测序数据分析通则
4.GB/T35537-2017合成寡核苷酸质量要求
5.ISO/IEC17025:2017检测实验室通用要求
检测设备
1.IlluminaNovaSeq6000:全基因组测序平台(读长2150bp)
2.ThermoFisherQuantStudio7Pro:实时荧光定量PCR仪(灵敏度0.1pg)
3.Agilent4200TapeStation:核酸完整性分析系统(DIN值≥7)
4.BeckmanCoulterBiomeki7:自动化液体处理工作站(移液精度1%)
5.OxfordNanoporeGridION:长读长测序设备(读长≥10kb)
6.Bio-RadCFXOpus96:梯度PCR仪(温控精度0.1℃)
7.EppendorfMastercyclerX50s:热循环仪(升降温速率6℃/s)
8.QiagenQIAcubeHT:高通量核酸纯化系统(通量96样本/批次)
9.AppliedBiosystems3730xl:毛细管电泳仪(分辨率1bp)
10.RocheLightCycler480II:多重荧光定量系统(6色通道)