半斑珞颜蜡蝉检测

检测项目1.成虫形态特征测量:体长(8.5-10.2mm)、前翅斑纹面积比(12-15%)、后足胫节刺列数(3-4组)2.分子生物学鉴定:线粒体COI基因序列(658bp)、ITS1区段扩增产物(450-500bp)、16SrRNA特异性位点比对3.寄主植物残留物检测:唾液鞘显微结构分析(长度120-150μm)、植物DNA条形码匹配(rbcL+matK)4.地理种群溯源:稳定同位素δ13C(-28‰至-25‰)、δ15N(3.5-6.8‰)比值测定5.抗药性基因筛查:乙酰胆碱酯酶Ace1基因突变)

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检测项目

1.成虫形态特征测量:体长(8.5-10.2mm)、前翅斑纹面积比(12-15%)、后足胫节刺列数(3-4组)

2.分子生物学鉴定:线粒体COI基因序列(658bp)、ITS1区段扩增产物(450-500bp)、16SrRNA特异性位点比对

3.寄主植物残留物检测:唾液鞘显微结构分析(长度120-150μm)、植物DNA条形码匹配(rbcL+matK)

4.地理种群溯源:稳定同位素δ13C(-28‰至-25‰)、δ15N(3.5-6.8‰)比值测定

5.抗药性基因筛查:乙酰胆碱酯酶Ace1基因突变位点(F331W)、细胞色素P450CYP6家族表达量测定

检测范围

1.进出口水果表面附着虫体(柑橘类/芒果/荔枝)

2.木质包装材料内部潜伏若虫

3.园林苗木叶背卵块样本

4.昆虫标本馆历史收藏标本复核

5.无人机采集的空中迁飞个体

检测方法

ASTME1752-08(2020)昆虫标本制备标准规程

ISO/IEC17025:2017分子生物学实验室能力验证规范

GB/T35342-2017植物检疫昆虫标本制作技术规程

SN/T2031-2021进境水果害虫检疫鉴定方法

GB/T36850-2018转基因生物环境安全检测技术导则

检测设备

OlympusBX53研究级显微镜:配备DP27显微相机,实现500下翅脉结构测量

Bio-RadT100ThermalCycler:执行COI基因PCR扩增程序(94℃预变性5min)

ThermoQExactiveHF-X质谱仪:完成稳定同位素比值精确测定(分辨率240,000)

IlluminaNovaSeq6000测序仪:开展全基因组重测序(PE150模式)

LeicaCM1950冷冻切片机:制备唾液鞘横切样本(切片厚度8μm)

Agilent4200TapeStation系统:进行DNA/RNA完整性评估(RIN值≥7.0)

PerkinElmerClarus580GC-MS:分析虫体挥发性信息素成分(β-石竹烯含量测定)

CarlZeissSIGMA场发射电镜:观察产卵器超微结构(加速电压5kV)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

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