检测项目

1.形态学鉴定：测量成虫体长（5.3-6.1mm）、前翅脉序特征（R脉分叉角度322）、胫节色斑面积占比（≥85%）

2.线粒体COI基因序列分析：目标片段长度658bp，比对率≥99%判定为阳性

3.植原体携带检测：16SrRNA基因扩增（引物P1/P7），退火温度52℃0.5℃

4.寄主植物关联性测试：刺吸行为持续时长≥120s/24h判定为有效传播媒介

5.抗药性监测：LC50值测定（吡虫啉≤0.12mg/L为敏感种群）

检测范围

1.葡萄属（Vitisspp.）苗木及接穗

2.进出口鲜食葡萄果品（含水率≤15%）

3.农林生态系统土壤样本（深度0-30cm）

4.木质包装材料（ISPM15标准适用）

5.实验室保藏昆虫标本（乙醇浓度≥75%）

检测方法

1.ISO21571:2005分子生物学检测通则

2.GB/T28084-2011植物检疫昆虫标本制备规程

3.EPPOPM7/129(1)植原体实时荧光PCR检测法

4.ASTME1752-17昆虫抗药性生物测定标准指南

5.GB/T35348-2017进境葡萄繁殖材料检疫规程

检测设备

1.OlympusBX53生物显微镜：配备DP27成像系统（分辨率20481536）

2.Bio-RadT100ThermalCycler：温控精度0.1℃

3.Agilent4200TapeStation系统：DNA完整性指数（DIN≥7）测定

4.EppendorfCentrifuge5424R：最大转速15,300rpm（RCF21,130g）

5.LeicaEMCPD300临界点干燥仪：压力范围0-150bar（CO2介质）

6.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：吸光度测量精度1%

7.SartoriusCP225D电子天平：称量精度0.01mg（最大量程220g）

8.MemmertIPP110培养箱：温度均匀性0.3℃（20-60℃范围）