检测项目
1.孢子形态学分析:测量分生孢子长度(18-35μm)、宽度(3.5-5μm)及隔膜数量(3-7个)
2.菌丝生长特性:测定25-28℃培养条件下菌落直径日增长量(0.8-1.2mm/24h)
3.致病性验证:采用离体叶片接种法观察病斑扩展速率(≥3mm/48h)
4.分子鉴定:ITS序列扩增(引物ITS4/ITS5),目标片段长度520-550bp
5.抗药性测试:测定对苯醚甲环唑的EC50值(0.05-0.15μg/mL)
检测范围
1.蕨类植物活体样本(鳞毛蕨科植物叶片病斑组织)
2.温室栽培基质(泥炭土/腐殖土混合样本)
3.植物病理标本馆保存的干制标本(采集时间≤5年)
4.组培苗污染源分析(培养基残留物)
5.进口植物检疫样品(新鲜切枝/球茎类产品)
检测方法
1.ISO17089:2018《植物病原真菌显微鉴定规范》孢子测量方法
2.GB/T28046-2019《植物病原菌分离培养技术规程》菌株纯化流程
3.ASTMD8083-21《植物病原真菌分子鉴定标准指南》DNA提取流程
4.GB/T36852-2018《植物病害诊断技术规程》综合鉴定要求
5.ISO21469:2020《植物病原菌抗药性测定通用方法》药敏试验方案
检测设备
1.OlympusBX53荧光显微镜(配备DP27数码相机,400油镜观测)
2.ThermoScientificHeratherm微生物培养箱(温度精度0.1℃)
3.Bio-RadT100PCR仪(支持梯度退火程序)
4.Agilent4200TapeStation系统(DNA完整性检测)
5.EppendorfCentrifuge5430R(最大转速30,000rpm)
6.MemmertHPP750恒温恒湿箱(湿度控制范围30-95%RH)
7.LeicaCM1950冷冻切片机(切片厚度1-50μm可调)
8.SartoriusQuintix224-1CN分析天平(精度0.1mg)
9.ThermoNanoDropOne超微量分光光度计(DNA浓度测定)
10.ZeissAxioZoom.V16宏观变焦显微镜(病斑整体观测)