检测项目
1.生化特性鉴定:包括氧化酶活性试验(阳性判定)、葡萄糖发酵能力(产酸不产气)、溶血活性测定(β型溶血)
2.毒力基因检测:aerA(气溶素基因)、hlyA(溶血素基因)、act(细胞毒性肠毒素)的PCR扩增
3.抗生素敏感性测试:氨苄西林(10μg)、庆大霉素(10μg)、环丙沙星(5μg)等14种药物的CLSI标准药敏试验
4.分子生物学鉴定:16SrRNA基因测序(V3-V4区扩增),同源性比对阈值≥99%
5.环境适应性分析:温度耐受范围(15-42℃)、盐度耐受梯度(0-6%NaCl)生长实验
检测范围
1.水产养殖品:包括罗非鱼、鲈鱼等淡水鱼类体表粘液及内脏组织样本
2.临床医学样本:创伤感染患者的伤口分泌物及血液培养物
3.环境监测样本:淡水养殖水体(需氧量≤5mg/L时重点监测)
4.食品加工设备:传送带表面生物膜采样(接触面面积≥100cm)
5.动物饲料原料:鱼粉原料批次抽检(水分活度>0.85时强制检测)
检测方法
ISO21872-1:2017《食品和动物饲料微生物学-潜在肠道致病性弧菌科检测》第1部分:副溶血弧菌和气单胞菌属
GB/T4789.28-2022《食品卫生微生物学检验培养基和试剂质量要求》
ASTME2146-01(2013)《环境样本中细菌核酸提取的标准指南》
SN/T1870-2016《出口食品中致病菌检测方法实时荧光PCR法》
CLSIM45-A3《需氧菌稀释法药敏试验性能标准》第三版
检测设备
ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:用于毒力基因的定量分析及熔解曲线判定
BioMrieuxVITEK2Compact全自动微生物鉴定系统:配置GN卡进行生化特征数据库比对
SartoriusIncubateShakerISF1-X:恒温振荡培养箱(控温精度0.2℃)
MilliporeSigma微生物过滤系统(0.22μm孔径滤膜):水体样本前处理装置
OlympusCX43生物显微镜:配备100油镜观察鞭毛染色标本
Agilent4200TapeStation系统:核酸完整性检测(DNA完整性数≥7.0)
BDPhoenixM50全自动药敏分析仪:符合CLSI标准的微量肉汤稀释法平台
ESCOA2型二级生物安全柜:满足NSF49标准的样本处理防护设备