检测项目
1.核仁纤维中心(FC)与致密纤维组分(DFC)的形态学参数:直径测量(50-200nm)、空间排布密度(3-5个/μm)
2.rRNA转录活性测定:每分钟每单位面积新生RNA链延伸速率(0.5-1.2kb/min)
3.核仁相关蛋白定量分析:Nucleolin(≥85%纯度)、Fibrillarin(0.8-1.5μg/mg总蛋白)
4.染色质结合效率:DNA结合能力(≥90%结合率)、解离常数Kd(10⁻⁷-10⁻⁹M)
5.三维重构参数:体积重建精度(5nm)、空间分辨率(≤2nm)
检测范围
1.哺乳动物细胞系(HEK293、HeLa等)核仁分离样品
2.肿瘤组织活检样本中异常核仁结构
3.基因编辑模型(CRISPR/Cas9)核仁重组产物
4.抗肿瘤药物作用后核仁应激小体
5.衰老细胞核仁解聚中间态物质
检测方法
ASTME3060-16亚细胞结构电子显微镜表征规范
ISO21368:2020生物样本超微结构分析通则
GB/T39126-2020细胞核组分分离与纯化技术规程
GB4789.41-2020核酸-蛋白质复合物稳定性测试方法
ISO10993-22:2017生物材料亚细胞毒性评价标准
检测设备
1.JEOLJEM-2100F场发射透射电镜:0.19nm点分辨率,配备电子断层扫描模块
2.LeicaTCSSP8STED超分辨显微镜:XY分辨率50nm,Z轴分辨率140nm
3.BeckmanOptimaXPN-100超速离心机:最大转速100,000rpm,温控精度0.1℃
4.MalvernZetasizerNanoZSP动态光散射仪:粒径测量范围0.3nm-10μm
5.ThermoFisherOrbitrapFusionLumos质谱仪:质量精度<1ppm,扫描速率20Hz
6.ZeissLSM980withAiryscan2共聚焦系统:空间分辨率120nm@488nm
7.BrukerDimensionIcon原子力显微镜:扫描范围90μm90μm10μm
8.Agilent2100Bioanalyzer微流控芯片系统:核酸灵敏度0.5ng/μL
9.PerkinElmerOperettaCLS高内涵成像系统:60倍水镜NA1.2
10.NikonN-STORM超分辨成像系统:定位精度8nm@640nm