检测项目

1.病原菌形态观察:孢子囊大小(18-2816-24μm)、卵孢子直径(30-50μm)、孢囊梗形态特征

2.分子生物学鉴定:ITS序列分析(引物ITS4/ITS5)、β-tubulin基因扩增

3.生理生化特性:最适生长温度(15-20℃)、pH耐受范围(5.5-7.0)、碳源利用谱

4.病害严重度分级:病斑面积占比(0级:无病斑;4级:>50%叶面积)

5.抗药性监测:甲霜灵EC50值测定(0.1-10μg/mL梯度浓度)

检测范围

1.油菜叶片病斑样本(含典型白色疱状孢子堆)

2.茎秆维管束组织切片(观察菌丝侵染深度)

3.土壤残留病原菌卵孢子(0-20cm耕作层取样)

4.种子带菌检测(千粒重≤4g品种需重点筛查)

5.周边寄主植物(如荠菜、萝卜等十字花科作物)

检测方法

1.ISO21458:2009《植物病原卵菌分子检测通用准则》

2.GB/T2930.5-2017《牧草种子检验规程健康测定》

3.ASTMD8083-16《实时荧光定量PCR法测定植物病原体》

4.NY/T3088-2017《油菜菌核病和霜霉病田间调查技术规范》

5.GB/T38581-2020《植物检疫处理基本准则》

检测设备

1.OlympusBX53荧光显微镜(400油镜观察孢子形态)

2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(基因拷贝数定量)

3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(核酸提取转速≥13000rpm)

4.MemmertIPP110培养箱(温度控制精度0.3℃)

5.LeicaCM1950冷冻切片机(组织切片厚度10-30μm)

6.SartoriusCP225D电子天平(称量精度0.01mg)

7.BioTekSynergyH1酶标仪(OD600值测定菌液浓度)

8.ThermoScientificHeratherm烘箱(玻片干燥温度602℃)

9.MilestoneETHOSUP微波消解仪(土壤样本前处理)

10.NikonSMZ25体视显微镜(病斑立体形态观察)