检测项目

1.病原菌形态观察：孢子囊大小（18-2816-24μm）、卵孢子直径（30-50μm）、孢囊梗形态特征

2.分子生物学鉴定：ITS序列分析（引物ITS4/ITS5）、β-tubulin基因扩增

3.生理生化特性：最适生长温度（15-20℃）、pH耐受范围（5.5-7.0）、碳源利用谱

4.病害严重度分级：病斑面积占比（0级：无病斑；4级：＞50%叶面积）

5.抗药性监测：甲霜灵EC50值测定（0.1-10μg/mL梯度浓度）

检测范围

1.油菜叶片病斑样本（含典型白色疱状孢子堆）

2.茎秆维管束组织切片（观察菌丝侵染深度）

3.土壤残留病原菌卵孢子（0-20cm耕作层取样）

4.种子带菌检测（千粒重≤4g品种需重点筛查）

5.周边寄主植物（如荠菜、萝卜等十字花科作物）

检测方法

1.ISO21458:2009《植物病原卵菌分子检测通用准则》

2.GB/T2930.5-2017《牧草种子检验规程健康测定》

3.ASTMD8083-16《实时荧光定量PCR法测定植物病原体》

4.NY/T3088-2017《油菜菌核病和霜霉病田间调查技术规范》

5.GB/T38581-2020《植物检疫处理基本准则》

检测设备

1.OlympusBX53荧光显微镜（400油镜观察孢子形态）

2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（基因拷贝数定量）

3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机（核酸提取转速≥13000rpm）

4.MemmertIPP110培养箱（温度控制精度0.3℃）

5.LeicaCM1950冷冻切片机（组织切片厚度10-30μm）

6.SartoriusCP225D电子天平（称量精度0.01mg）

7.BioTekSynergyH1酶标仪（OD600值测定菌液浓度）

8.ThermoScientificHeratherm烘箱（玻片干燥温度602℃）

9.MilestoneETHOSUP微波消解仪（土壤样本前处理）

10.NikonSMZ25体视显微镜（病斑立体形态观察）