检测项目

1.成虫形态学鉴定：体长1.8-2.3mm，翅脉特征R1脉分叉角度453，后足胫节端距数量3-4个

2.若虫发育阶段判定：依据腹节蜡腺分布密度（≥15个/mm为5龄若虫）及复眼发育程度分级

3.病原菌携带检测：16SrRNA基因序列扩增（引物OI1/OI2c），Ct值≤35判定阳性

4.抗药性基因筛查：靶向CYP6家族P450基因突变位点（L993F/V1016I）

5.种群密度测定：单位叶面积（cm）虫卵数≥5个为高风险阈值

检测范围

1.柑橘属植株新生梢叶及花蕾样本

2.苗圃嫁接用接穗与砧木材料

3.果园土壤及灌溉水样微生物群落

4.进出口植物产品木质包装材料

5.农用器械及运输工具表面残留物

检测方法

ISO17025:2017《实验室质量管理体系》样本前处理规范

GB/T31746-2015《柑橘黄龙病监测技术规程》田间调查方法

ASTME1758-01(2020)实时荧光定量PCR技术标准

SN/T2124-2008《进出境植物检疫昆虫标本制作规程》

NY/T2729-2015《农药田间药效试验准则》抗性监测方案

检测设备

LeicaDM500生物显微镜：400油镜观察口器结构特征

ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪：灵敏度达10copies/μL

Agilent4200TapeStation系统：DNA完整性指数(DIN)≥7.0判定合格

BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪：虫卵活力测定精度0.5%

SartoriusCP225D电子天平：称量精度0.01mg用于农药残留分析

ESCOAC2-4S1生物安全柜：符合NSF/ANSI49ClassII标准

MemmertIPP110培养箱：温度波动度0.3℃用于病原菌培养

PerkinElmerLambda365紫外分光光度计：核酸浓度OD260/280比值1.8-2.0

OlympusSZX16体视显微镜：20变倍比观察虫体整体形态

MettlerToledoSevenExcellencepH计：分辨率0.001用于缓冲液配制