检测项目

1.病原菌分离培养：采用PDA培养基（pH6.80.2），25℃暗培养72小时观察菌丝特征

2.分子生物学鉴定：ITS序列扩增（引物ITS1/ITS4），PCR产物长度500-600bp

3.孢子形态分析：测量厚垣孢子直径（18-25μm）、担孢子大小（6-93-4μm）

4.土壤带菌量测定：单位体积土壤菌核计数（≥10个/g为高风险阈值）

5.植株侵染指数：根表紫色菌丝覆盖率分级（0-4级评价体系）

检测范围

1.甘薯块根表皮及维管束组织样本

2.田间发病植株茎基部皮层组织

3.耕作层土壤样本（0-30cm深度）

4.农用灌溉水样（过滤膜法收集微生物）

5.种苗检疫材料（包括组培苗与扦插苗）

检测方法

1.ISO16140-3:2021《分子生物学方法验证规范》用于病原菌特异性基因检测

2.GB/T28068-2011《甘薯病害鉴定技术规范》规定田间调查方法

3.ASTMD7928-21《土壤微生物定量分析标准》指导菌核计数

4.NY/T401-2000《农作物种子产地检疫规程》规范种苗检疫流程

5.JISK3850-1:2020《空气中微生物采集方法》适用于孢子捕捉分析

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光PCR仪：用于病原菌DNA定量分析

2.OlympusBX53生物显微镜：配备DP27摄像系统进行显微形态观察

3.MemmertIPP110培养箱：精准控温（0.3℃）用于菌株纯化培养

4.SartoriusCP225D电子天平：称量精度0.01mg的培养基配制

5.MilliporeSigma微生物过滤装置（孔径0.45μm）：水样病原菌富集

6.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机：最大转速15,000rpm的DNA提取

7.METTLERTOLEDOSevenExcellencepH计：培养基pH值精确测定

8.LeicaCM1950冷冻切片机：制作10μm厚度的组织病理切片

9.BioTekSynergyH1酶标仪：OD600法测定菌丝生物量

10.OhausPioneerPA214C分析天平：土壤样本称量（精度0.0001g）