检测项目

1.形态特征鉴定:体长0.88-1.36mm测量精度0.02mm;前翅端斑纹面积占比≥35%;触角第3节长度/宽度比≥2.5

2.病原菌(CandidatusLiberibacterasiaticus)携带量检测:16SrRNA基因拷贝数≥10copies/μL检出限

3.抗药性监测:LC50值测定范围0.01-100mg/L;乙酰胆碱酯酶活性抑制率≥70%判定为抗性个体

4.卵孵化率测定:温度251℃条件下孵化率误差≤3%

5.种群密度统计:单位面积(10cm)若虫数量≥5头判定为高密度危害

检测范围

1.柑橘属苗木(嫁接苗/实生苗)韧皮部组织样本

2.果实表面残留卵粒及分泌物样本

3.新梢嫩叶若虫聚集部位样本

4.土壤中越冬成虫残留DNA样本

5.农药残留样本(有机磷类/拟除虫菊酯类)

检测方法

1.GB/T34748-2017《柑橘黄龙病菌实时荧光PCR检测方法》定量分析病原菌载量

2.ISO21571:2005分子生物学检测规范进行DNA提取与纯化

3.ASTME2455-06标准显微测量技术进行形态学鉴定

4.GB/T17980.108-2004农药田间药效试验准则进行抗药性测试

5.NY/T3087-2017柑橘木虱监测技术规范开展种群动态监测

检测设备

1.OlympusBX53生物显微镜(40-1000倍连续变倍):体视显微观察与测量系统

2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:病原菌核酸定量分析

3.Agilent7890B气相色谱仪:农药残留成分分离与定量

4.MettlerToledoXS205电子天平(0.01mg精度):样本称量处理

5.MemmertICP600恒温培养箱(温度波动0.3℃):卵孵化环境控制

6.LeicaCM1950冷冻切片机(-35℃至+60℃):组织样本制备

7.BioTekSynergyH1酶标仪(波长范围200-999nm):酶活性测定

8.SartoriusMilli-QIQ7000超纯水系统(电阻率18.2MΩcm):实验用水制备

9.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(最大转速15000rpm):核酸提取分离

10.NikonSMZ25体视显微镜(115倍放大):野外快速筛查系统