检测项目
1.形态特征鉴定:体长0.88-1.36mm测量精度0.02mm;前翅端斑纹面积占比≥35%;触角第3节长度/宽度比≥2.5
2.病原菌(CandidatusLiberibacterasiaticus)携带量检测:16SrRNA基因拷贝数≥10copies/μL检出限
3.抗药性监测:LC50值测定范围0.01-100mg/L;乙酰胆碱酯酶活性抑制率≥70%判定为抗性个体
4.卵孵化率测定:温度251℃条件下孵化率误差≤3%
5.种群密度统计:单位面积(10cm)若虫数量≥5头判定为高密度危害
检测范围
1.柑橘属苗木(嫁接苗/实生苗)韧皮部组织样本
2.果实表面残留卵粒及分泌物样本
3.新梢嫩叶若虫聚集部位样本
4.土壤中越冬成虫残留DNA样本
5.农药残留样本(有机磷类/拟除虫菊酯类)
检测方法
1.GB/T34748-2017《柑橘黄龙病菌实时荧光PCR检测方法》定量分析病原菌载量
2.ISO21571:2005分子生物学检测规范进行DNA提取与纯化
3.ASTME2455-06标准显微测量技术进行形态学鉴定
4.GB/T17980.108-2004农药田间药效试验准则进行抗药性测试
5.NY/T3087-2017柑橘木虱监测技术规范开展种群动态监测
检测设备
1.OlympusBX53生物显微镜(40-1000倍连续变倍):体视显微观察与测量系统
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:病原菌核酸定量分析
3.Agilent7890B气相色谱仪:农药残留成分分离与定量
4.MettlerToledoXS205电子天平(0.01mg精度):样本称量处理
5.MemmertICP600恒温培养箱(温度波动0.3℃):卵孵化环境控制
6.LeicaCM1950冷冻切片机(-35℃至+60℃):组织样本制备
7.BioTekSynergyH1酶标仪(波长范围200-999nm):酶活性测定
8.SartoriusMilli-QIQ7000超纯水系统(电阻率18.2MΩcm):实验用水制备
9.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(最大转速15000rpm):核酸提取分离
10.NikonSMZ25体视显微镜(115倍放大):野外快速筛查系统