检测项目

1.形态特征鉴定：体长2.5-3.5mm，前胸背板黄白色纵纹特征，后足胫节端距数量（6-8个）

2.mtDNACOI基因测序：目标序列658bp，比对GenBank数据库BOLD系统

3.抗药性监测：LC50值测定（毒死蜱/吡虫啉/噻虫嗪），抗性倍数≥10倍判定为高抗

4.种群密度监测：百丛虫量分级标准（Ⅰ级＜50头，Ⅱ级50-200头，Ⅲ级＞200头）

5.病毒携带检测：水稻条纹叶枯病毒（RSV）RT-PCR检测（引物RSV-F:5'-ATGGCTCAAGTCGAACA-3'）

检测范围

1.水稻植株样本：分蘖期至灌浆期植株（主茎基部30cm处取样）

2.土壤越冬样本：稻田耕作层0-15cm土壤（温度≤10℃时采集）

3.成虫标本：完整虫体（前翅脉纹清晰可见）

4.卵块样本：叶鞘内侧卵粒（单卵块≥20粒）

5.迁飞种群样本：高空诱集器捕获样本（海拔500m以上）

检测方法

1.ISO7346-3:1996农药生物测定规范（浸渍法测定LC50值）

2.GB/T15794-2023稻飞虱田间调查与分级标准

3.GB/T17980.116-2023农药田间药效试验准则（杀虫剂防治稻飞虱）

4.SN/T5359-2021植物检疫灰稻飞虱检疫鉴定方法

5.NY/T3088-2017水稻主要害虫抗药性监测技术规程

检测设备

1.OlympusSZX16体视显微镜：40-160倍连续变倍观察虫体形态特征

2.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪：完成COI基因扩增程序（94℃预变性5min）

3.Agilent4200TapeStation系统：DNA/RNA完整性检测（DIN值≥7.0）

4.LeicaDM3000LED生物显微镜：翅脉显微成像（100油镜观察）

5.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：ELISA法病毒载量测定（OD450nm读数）

6.SartoriusCP225D电子天平：精确称量0.1mg级药剂样品

7.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机：RNA提取（12,000g离心15min）

8.MemmertICP600恒温培养箱：养虫室环境控制（261℃，RH75%）

9.PerkinElmerClarus580GC-MS：农药残留成分分析（DB-5MS色谱柱）

10.NikonSMZ25荧光立体显微镜：GFP标记病毒追踪观察（激发波长488nm）