检测项目
1.形态特征鉴定:体长测量(雄性14-25mm/雌性20-35mm)、后足胫节颜色(红色至粉红色)、前胸背板条纹形态(双平行纹)
2.线粒体COI基因测序:目标序列长度658bp,覆盖COI基因保守区段(LCO1490/HCO2198引物)
3.血淋巴蛋白电泳:SDS-PAGE分析(12%分离胶),分子量标记14.4-116kDa
4.表皮碳氢化合物分析:GC-MS检测C23-C37直链烷烃及甲基分支烷烃含量
5.卵荚形态参数:长度测量(8-12mm)、卵室数量(25-35个/卵荚)、卵粒直径(1.2-1.5mm)
检测范围
1.农作物样本:小麦叶片残留啃食痕迹样本(单齿距0.3-0.5mm)
2.土壤样本:越冬卵荚采集(耕作层0-15cm深度)
3.昆虫标本:成虫/若虫乙醇浸泡标本(75%浓度保存液)
4.植物检疫材料:进出口粮谷夹带虫体碎片(筛下物粒径≤2mm)
5.仓储产品:干草捆内部虫体残留物(温度302℃环境样本)
检测方法
1.ASTMD7921-21《昆虫表皮碳氢化合物气相色谱分析方法》
2.ISO/IEC17025:2017《分子生物学检测实验室能力验证规范》
3.GB/T31734-2015《蝗虫种类分子鉴定方法》
4.SN/T2032-2007《进出境植物检疫蝗虫鉴定规程》
5.FAO《沙漠蝗监测操作手册》(2020版)种群密度测算方法
检测设备
1.NikonSMZ25体视显微镜:20x-100x连续变倍观察系统,配备DS-Fi3显微相机
2.Bio-RadT100PCR仪:96孔梯度温控系统(4℃-99℃0.1℃)
3.Agilent7890B气相色谱仪:配备HP-5MS毛细管柱(30m0.25mm0.25μm)
4.ThermoQExactive质谱仪:分辨率140,000@m/z200,质量精度<3ppm
5.EppendorfCentrifuge5430R:最大转速15,300rpm,温控范围-9℃至40℃
6.LeicaCM1950冷冻切片机:样本冷却温度-50℃,切片厚度1-100μm可调
7.OlympusBX53荧光显微镜:配备U-FBNA滤色块(激发波长470-495nm)
8.BeckmanCoulterCEQ8000遗传分析仪:8通道毛细管电泳系统(片段分析精度1bp)
9.MettlerToledoXS205电子天平:量程82g,可读性0.01mg
10.MemmertIPP110培养箱:温度范围0-70℃,湿度控制10-90%RH1%