检测项目

1.病原菌分子鉴定:基于ITS序列比对(GenBank数据库),特异性引物SS1/SS2扩增

2.菌核数量测定:单位质量样本中活性菌核计数(≥0.5mm直径)

3.孢子悬浮液浓度:血球计数板法测定(10^3-10^6孢子/毫升)

4.抗药性分析:多菌灵EC50值测定(梯度浓度0.1-100μg/mL)

5.致病力评估:离体叶片侵染率测定(接种后72小时病斑面积占比)

检测范围

1.紫云英种子样本:单批次≥200粒健康度筛查

2.田间土壤样本:0-20cm耕作层菌核密度分析

3.发病植株组织:茎基部病健交界处病原分离

4.有机肥料基质:腐熟度与带菌风险评价

5.灌溉水样:滤膜法捕获水体悬浮孢子体

检测方法

ISO16067:2018《植物病原真菌孢子浓度测定规范》

GB/T3543.7-2021《农作物种子检验规程健康检验》

ASTMD8083-16《实时荧光定量PCR法检测植物病原真菌》

NY/T3088-2017《核盘菌抗药性监测技术规程》

SN/T5364.6-2021《出口植物源性食品中真菌毒素测定》

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(病原DNA定量)

2.OlympusBX53微分干涉显微镜(菌核形态学观察)

3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(孢子富集)

4.MemmertIPP110培养箱(恒温251℃菌落培养)

5.SartoriusCP225D电子天平(0.1mg精度称量)

6.MilliporeGSWP04700滤膜装置(水体孢子过滤)

7.BioTekSynergyH1酶标仪(抗药性EC50计算)

8.LeicaMC170HD显微成像系统(病斑面积分析)