检测项目

1.病原菌分子鉴定：基于ITS序列比对（GenBank数据库），特异性引物SS1/SS2扩增

2.菌核数量测定：单位质量样本中活性菌核计数（≥0.5mm直径）

3.孢子悬浮液浓度：血球计数板法测定（10^3-10^6孢子/毫升）

4.抗药性分析：多菌灵EC50值测定（梯度浓度0.1-100μg/mL）

5.致病力评估：离体叶片侵染率测定（接种后72小时病斑面积占比）

检测范围

1.紫云英种子样本：单批次≥200粒健康度筛查

2.田间土壤样本：0-20cm耕作层菌核密度分析

3.发病植株组织：茎基部病健交界处病原分离

4.有机肥料基质：腐熟度与带菌风险评价

5.灌溉水样：滤膜法捕获水体悬浮孢子体

检测方法

ISO16067:2018《植物病原真菌孢子浓度测定规范》

GB/T3543.7-2021《农作物种子检验规程健康检验》

ASTMD8083-16《实时荧光定量PCR法检测植物病原真菌》

NY/T3088-2017《核盘菌抗药性监测技术规程》

SN/T5364.6-2021《出口植物源性食品中真菌毒素测定》

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（病原DNA定量）

2.OlympusBX53微分干涉显微镜（菌核形态学观察）

3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机（孢子富集）

4.MemmertIPP110培养箱（恒温251℃菌落培养）

5.SartoriusCP225D电子天平（0.1mg精度称量）

6.MilliporeGSWP04700滤膜装置（水体孢子过滤）

7.BioTekSynergyH1酶标仪（抗药性EC50计算）

8.LeicaMC170HD显微成像系统（病斑面积分析）