检测项目

1.病原菌分离培养：采用PDA培养基（pH6.00.2），培养温度251℃，湿度85%5%，观察菌落形态特征

2.孢子活性测定：孢子悬浮液浓度≥110⁶CFU/mL时测定萌发率（≥90%为活性合格）

3.叶片病斑分析：测量病斑直径（≥3mm为阳性），计算病斑面积占比（≥5%判定为重度感染）

4.分子生物学鉴定：ITS序列扩增（引物ITS1/ITS4），PCR产物长度500-700bp

5.抗药性测试：测定EC50值（有效抑制浓度），苯醚甲环唑敏感阈值≤0.5mg/L

检测范围

1.山茶属（Camelliajaponica）栽培植株的叶片样本

2.进口茶梅种苗的检疫材料

3.栽培基质土壤（深度0-20cm）样本

4.灌溉水源及农用工具表面残留物

5.进出口包装木质材料（含水率≤18%）

检测方法

1.GB/T23222-2008《植物检疫病原真菌分离培养技术规范》

2.ISO16140-4:2020《分子生物学方法验证技术指南》

3.ASTMD7786-14《植物病原菌孢子活性测定标准方法》

4.GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程病害检验》

5.SN/T2127-2015《进出境植物病原真菌检疫鉴定规范》

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（核酸定量分析）

2.LeicaDM750生物显微镜（1000倍显微观察）

3.MemmertIPP110培养箱（温控精度0.1℃）

4.SartoriusQuintix224-1CN分析天平（精度0.1mg）

5.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机（最大转速15000rpm）

6.BinderKB115恒温恒湿箱（湿度控制范围30%-95%）

7.BioTekSynergyH1酶标仪（吸光度测量范围0-4OD）

8.OlympusSZX16体视显微镜（8-115连续变倍）

9.MettlerToledoSevenExcellencepH计（分辨率0.01pH）

10.LabconcoPurifierLogic+生物安全柜（HEPA过滤效率99.99%）