检测项目

1.成虫形态学特征：体长测量（2.5-4.8mm）、前翅端部斑纹分布模式、后足胫节刺数量（6-8根）

2.COI基因序列分析：658bp线粒体细胞色素氧化酶亚基I片段扩增与NCBI数据库比对

3.卵形态参数：卵长0.8-1.2mm直径0.2-0.3mm，卵帽高度0.05-0.08mm

4.若虫发育阶段判定：依据腹节蜡质分泌物分布及触角节数（5龄期特征）

5.抗药性酶活性检测：乙酰胆碱酯酶（AChE）抑制率≤70%，羧酸酯酶（CarE）比活力≥3.5U/mgprot

检测范围

1.水稻田间植株（分蘖期至孕穗期）茎秆内部虫体

2.土壤样本中越冬卵群体密度（0-20cm耕作层）

3.迁飞种群高空诱捕器捕获标本（500-1500m海拔梯度）

4.农药残留试验用试虫群体（F1-F3代室内饲养种群）

5.仓储稻谷携带的检疫性个体（含水率12%-14%样本）

检测方法

ISO22000:2018《植物检疫措施标准》第17章昆虫形态鉴定程序

GB/T27618-2011《水稻害虫检测技术规范》第4.3条飞虱科鉴定细则

ASTME1752-17《昆虫抗药性生物测定标准指南》点滴法施药规程

NY/T3088-2017《稻飞虱抗药性监测技术规程》酶联免疫法测定标准

SN/T1809-2006《进出境水稻检疫规程》实时荧光PCR检测方法

检测设备

1.HitachiSU3500扫描电镜：成虫体表微结构成像（2000-5000）

2.LeicaM205C体视显微镜：卵粒形态测量（0.63-11.5连续变倍）

3.Bio-RadT100PCR仪：COI基因扩增（94℃预变性5min/35循环）

4.ShimadzuUV-2600i分光光度计：CarE酶活性测定（λ=405nm）

5.MettlerToledoXS205电子天平：试虫称量（精度0.01mg）

6.ThermoScientificHeratherm培养箱：若虫恒温饲养（261℃RH70%）

7.Agilent2100生物分析仪：DNA片段纯度检测（DV200≥80%）

8.OlympusBX53荧光显微镜：Wolbachia共生菌荧光标记观察

9.HamiltonMICROLABSTARlet移液工作站：微量样本精准分装

10.SartoriusCubisII精密天平：农药母液配制（最大称量82gd=0.001mg）