检测项目
1.虫体形态参数:雌成虫体长0.8-1.2mm,宽0.5-0.7mm;雄成虫体长0.6-0.8mm
2.介壳特征:雌介壳直径1.5-2.0mm,灰白色圆形;雄介壳长1.0-1.3mm,椭圆形
3.虫口密度:单位叶面积(cm)活虫数≥3头判定为重度侵染
4.分子鉴定:COI基因序列比对相似度≥98%
5.卵囊特征:单囊含卵量50-80粒,卵径0.15-0.20mm
检测范围
1.甘蔗种茎表皮附着物
2.田间植株叶鞘基部
3.加工原料残留叶片
4.运输工具缝隙残留物
5.土壤表层越冬虫体
检测方法
1.GB/T28063-2011《介壳虫检疫鉴定方法》形态学鉴定
2.ISO21772:2020《植物害虫分子检测通用要求》DNA条形码技术
3.SN/T1479-2017《进境甘蔗检疫规程》系统取样法
4.ASTME1752-17《植物病虫害定量评估标准》虫口密度计算
5.GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程》染色镜检法
检测设备
1.LeicaM205C体视显微镜:40-80倍连续变倍观察介壳纹路
2.ThermoNanoDropOne紫外分光光度计:DNA纯度检测(A260/A280≥1.8)
3.Bio-RadT100PCR仪:COI基因扩增(退火温度52℃0.5℃)
4.OlympusBX53荧光显微镜:DAPI染色卵粒计数
5.SartoriusCP225D电子天平:样品称量精度0.01mg
6.Eppendorf5920R高速冷冻离心机:12000rpm核酸提取
7.ZeissAxioImager.A2微分干涉显微镜:体毛分布形态观测
8.MemmertIPP110培养箱:28℃恒温饲养观察生活史
9.NikonSMZ25超景深显微镜:三维重构介壳结构
10.IlluminaMiSeq测序仪:16SrRNA宏基因组分析