检测项目

1.血红蛋白电泳分析：定量测定HbA2（正常参考值1.5%-3.5%）、HbF（<2%）及异常血红蛋白组分

2.红细胞渗透脆性试验：采用梯度NaCl溶液（0.30%-0.50%）测定溶血起始浓度

3.基因测序分析：靶向HBB基因外显子区域（chr11:5225464-5227072）进行二代测序

4.网织红细胞计数：流式细胞术测定绝对值（正常值25-7510^9/L）

5.铁代谢指标测定：血清铁蛋白（男20-250μg/L；女10-120μg/L）、转铁蛋白饱和度（20%-50%）

检测范围

1.EDTA-K2抗凝静脉全血样本（采血量≥3mL）

2.骨髓穿刺液涂片（瑞氏-吉姆萨染色）

3.DNA提取样本（浓度≥20ng/μL,OD260/280=1.7-2.0）

4.血清分离胶管样本（离心条件3000rpm10min）

5.冷冻保存红细胞悬液（保存温度-80℃2℃）

检测方法

1.ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》规范实验室管理体系

2.GB/T37874-2019《核酸提取纯化试剂盒质量评价技术规范》指导DNA提取

3.ASTME288-17《血清中总铁结合能力标准测试方法》

4.WS/T405-2012《血细胞分析参考区间》建立血液学参数基准

5.ISO/IEC17025:2017《检测和校准实验室能力通用要求》规范设备校准

检测设备

1.Capillarys3Tera全自动毛细管电泳仪（Sebia）：分辨率达1%异常血红蛋白

2.SysmexXN-1000血液分析仪：网织红细胞计数精度CV<3%

3.ThermoFisherQuantStudio7Pro实时荧光定量PCR仪：灵敏度达5拷贝/μL

4.BeckmanCoulterAU5800生化分析仪：铁代谢指标批内精密度CV<1.5%

5.NikonEclipseCi-L显微镜（100油镜）：红细胞形态学观察分辨率0.19μm

6.IlluminaNovaSeq6000测序平台：测序深度≥100,Q30≥85%

7.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机：最大转速30,000rpm

8.Bio-RadD-10糖化血红蛋白分析仪：CV值<1%的HPLC分离技术

9.MemmertINCOmed细胞培养箱：温度控制精度0.3℃

10.Agilent4200TapeStation系统：DNA完整性指数(DIN)评估≥7.0