检测项目
1.体长测量:成虫体长范围18-32mm,雌雄个体差异3mm
2.后足胫节特征:胫节刺列数8-10组,刺间距0.12-0.18mm
3.前胸背板斑纹:黑色条纹宽度0.5-0.8mm,纵向延伸度≥85%
4.COI基因序列:658bp片段GC含量42%-45%,特异性位点T23A/G56C
5.毒力蛋白测定:血淋巴中Paramyosin含量≥2.3μg/mL
检测范围
1.活体成虫样本(野外采集/实验室饲养)
2.卵鞘标本(保存时间≤5年)
3.植物残留物中的口器痕迹
4.土壤中蜕皮碎片(粒径>0.5mm)
5.仓储谷物表面排泄物微粒
检测方法
ISO21571:2005《分子生物学检测通用技术要求》
GB/T34748-2017《直翅目昆虫检疫鉴定规范》
ASTME1752-17《昆虫标本制备标准指南》
ISO7346-3:1996《生物毒性测试水蚤法》
GB/T28628-2012《材料中昆虫残留物显微检测法》
检测设备
OlympusBX53生物显微镜(1000油镜观察胫节微刺)
ThermoNanoDropOne超微量分光光度计(DNA纯度A260/A280≥1.8)
Bio-RadT100PCR仪(退火温度580.5℃)
Agilent4200TapeStation系统(DNA片段分析精度5bp)
LeicaM205C体视显微镜(三维成像分辨率4μm)
SartoriusCPA225D分析天平(称量精度0.01mg)
EppendorfCentrifuge5430R(离心力30000g)
ZeissAxioImager.A2荧光显微镜(DAPI激发波长358nm)
ShimadzuLC-20ATHPLC系统(C18色谱柱分离毒力蛋白)
KeyenceVHX-7000数码显微系统(景深合成精度0.1μm)