检测项目

1.菌丝体形态特征：测量菌丝直径（2.5-4.0μm）、隔膜间距（50-150μm）、分支角度（45-90）

2.分生孢子参数：测定分生孢子长度（8-15μm）、宽度（2-3μm）、长宽比（4:1-5:1）

3.ITS序列分析：比对核糖体ITS1-5.8S-ITS2区域（长度550-600bp），相似度≥99%

4.漆酶活性测定：采用ABTS法测定酶活力（U/g），反应温度30℃0.5℃

5.温度耐受性测试：设置梯度培养温度（5℃/10℃/15℃/20℃/25℃/30℃）

检测范围

1.松属植物木质部样本（包括红松、黑松、马尾松等）

2.松墨天牛虫体表面附着物及肠道内容物

3.木材加工制品（板材、木托盘、包装材料）

4.林区表层土壤（0-20cm深度）及枯落物层

5.松材线虫分离培养物中的共生真菌复合体

检测方法

ASTMD7788-14《木材病原真菌分子鉴定标准方法》

ISO21527-2:2008《真菌酵母菌计数与鉴定》

GB/T35818-2018《林业有害生物检测鉴定规程》

GB/T38581-2020《森林病害分子检测通用要求》

SN/T1840-2016《植物病原真菌检疫鉴定方法》

检测设备

OlympusBX53荧光显微镜：配备DP27相机（分辨率20481536），400油镜观测孢子结构

ThermoFisherQuantStudio5实时PCR仪：支持SYBRGreen法进行ITS基因扩增

SartoriusCPA225D分析天平：称量精度0.01mg，用于酶活测试样品称量

MemmertIPP110培养箱：温度控制精度0.1℃，用于梯度温度培养实验

BioTekSynergyH1酶标仪：波长范围200-999nm，ABTS法测定漆酶活性

Eppendorf5430R高速离心机：最大转速30,000rpm，用于菌体分离纯化

LeicaCM1950冷冻切片机：切片厚度5-10μm，制备木材样本显微切片

ThermoScientificHeratherm烘箱：温度范围40-250℃，灭菌处理培养器具