检测项目
1.形态特征鉴定:雌成螨体长280-320μm,背毛14对(含假气门器毛1对),后半体背中毛长度18-22μm
2.分子生物学检测:线粒体COI基因序列扩增(引物LCO1490/HCO2198),目标片段长度658bp
3.体壁微结构分析:背板网状纹饰孔径0.8-1.2μm,生殖盖片齿状突数量12-16个
4.发育阶段鉴别:幼螨足Ⅲ基节毛长度4.5-5.5μm,若螨肛毛长度25-30μm
5.寄主特异性测试:芭蕉属植物叶片表皮细胞损伤率≥85%
检测范围
1.芭蕉科植物叶片样本(含香蕉、大蕉、粉蕉等栽培品种)
2.植物检疫截获的入境繁殖材料(组培苗≤5cm)
3.土壤及栽培基质样本(粒径≤2mm)
4.仓储运输工具残留物(采集面积≥200cm)
5.实验室保种标本(乙醇固定液浓度≥75%)
检测方法
ISO23766:2018《植物检疫螨类形态学鉴定技术规范》第4.3章体壁测量法
GB/T3543.4-2020《农作物种子检验规程》第7章有害生物检测
ASTME1752-17《植物病原生物分子检测标准指南》实时荧光PCR法
SN/T2123-2016《进出境香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法》改良样本制备法
EPPOPM7/129(1)《诊断规程》DNA条形码技术应用标准
检测设备
1.奥林巴斯BX53研究级显微镜(物镜UPlanFLN100/1.30Oil)
2.HitachiSU8010场发射扫描电镜(分辨率1.0nm@15kV)
3.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(通道数6)
4.LeicaCM1950冷冻切片机(切片厚度1-100μm可调)
5.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(最大转速30,000rpm)
6.MoticBA410数码显微成像系统(像素500万)
7.Bio-RadT100梯度PCR仪(温控精度0.1℃)
8.SartoriusCP225D电子分析天平(精度0.01mg)
9.MemmertIPP110培养箱(温度波动度0.1℃)
10.MilestoneETHOSEASY微波消解仪(温度范围50-300℃)