检测项目

1.形态特征鉴定:体长180-220μm,背板纹饰呈网状结构,足Ⅰ胫节刚毛长度7-9μm

2.虫口密度测定:单位叶面积虫瘿数量统计(≥3个/cm为重度侵染)

3.分子生物学检测:COI基因序列比对(目标片段长度658bp)

4.危害程度分级:叶片畸形率(Ⅰ级<10%,Ⅱ级10-30%,Ⅲ级>30%)

5.越冬卵存活率检测:低温处理(-20℃1℃)72h后孵化实验

检测范围

1.黄连木(Pistaciachinensis)新鲜叶片及嫩枝样本

2.受侵染植株周边50m范围内土壤样品

3.苗木调运过程中的检疫样本

4.同属寄主植物(如阿月浑子Pistaciavera)

5.虫瘿组织切片(厚度8-10μm)

检测方法

1.ISO21748:2017《植物检疫处理指南-瘿螨科》形态鉴定流程

2.GB/T35334-2017《林业有害生物监测技术规程》虫口密度测定法

3.ASTME1752-17《植物病原分子检测标准指南》DNA提取规范

4.GB/T36852-2018《进出境植物检疫抽样方法》抽样比例要求

5.ISO/IEC17025:2017《检测实验室通用技术要求》质量控制体系

检测设备

1.奥林巴斯BX53研究级显微镜(配DP27数码成像系统):400显微测量精度1μm

2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法检测

3.LeicaCM1950冷冻切片机:-30℃低温切片厚度控制精度0.5μm

4.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机:最大转速15,000rpm

5.MettlerToledoXSR205DU分析天平:称量精度0.01mg

6.MemmertIPP110培养箱:温度控制范围0-70℃0.3℃

7.Bio-RadChemiDocMP成像系统:化学发光法核酸电泳分析

8.ZeissStemi508体视显微镜:10-50连续变倍观察虫瘿结构

9.ThermoScientificNanoDropOne超微量分光光度计:DNA纯度OD260/280比值测定

10.ESCOAC2-4S1生物安全柜:符合NSF49ClassIIA2型标准