检测项目
1.直接镜检:采用10%KOH溶液处理样本,显微镜400倍观察菌丝/孢子形态(检出率≥85%)
2.真菌培养:接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA),25-30℃培养2-4周(分离成功率≥90%)
3.MALDI-TOF质谱鉴定:BrukerBiotyper系统分析蛋白质图谱(数据库含300+皮肤癣菌条目)
4.PCR扩增:靶向ITS/28SrRNA基因区域(引物ITS1/ITS4),扩增产物测序比对NCBI数据库
5.体外药敏试验:CLSIM38-A3标准测试特比萘芬/伊曲康唑MIC值(浓度梯度0.03-16μg/mL)
检测范围
1.皮肤鳞屑样本(躯干/四肢皮损刮取物)
2.毛发样本(断发/毛囊炎拔取毛发)
3.甲屑样本(甲板分层/甲下碎屑)
4.临床分离菌株(保存于甘油管-80℃冻存)
5.抗真菌制剂(乳膏/洗剂中活性成分浓度验证)
检测方法
ASTME2149-20《抗菌活性动态接触测定》
ISO16256:2021《抗真菌药物敏感性试验参考方法》
GB/T39101-2020《病原微生物核酸定量检测》
WS/T497-2017《侵袭性真菌病临床实验室诊断操作指南》
CLSIM61-Ed2《抗真菌药敏试验折点标准》
检测设备
OlympusBX53显微镜:配备微分干涉对比(DIC)模块和DP27成像系统
ThermoScientificHeracell150iCO2培养箱:三气控制(温度精度0.1℃)
Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪:支持HRM熔解曲线分析
SartoriusQuintix224-1CN分析天平:称量精度0.1mg(符合GLP规范)
BrukerDaltonikMALDIBiotyperSirius系统:激光频率200Hz(质量范围1-100kDa)
ThermoMultiskanSkyHigh酶标仪:6波长滤光片(含405nm/450nm/630nm)
ESCOAirstreamClassII生物安全柜:垂直层流风速0.3m/s20%
SanyoMIR-154-PA低温培养箱:温度范围-10℃至50℃(波动度0.5℃)
IlluminaMiSeq测序平台:2300bp双端读长(通量15Gb/run)
BDPhoenixM50全自动微生物鉴定系统:含GYR菌种数据库(覆盖120+皮肤癣菌)