检测项目
1.形态特征鉴定:成虫翅展35-45mm,前翅灰褐色具锯齿状横纹;幼虫体长28-32mm,体表具黑色纵纹与白色毛簇
2.基因序列分析:线粒体COI基因片段(658bp)及核糖体ITS2区域(450-500bp)测序比对
3.寄主植物残留物检测:幼虫消化道内植物DNA提取及PCR扩增(trnL-F片段)
4.卵块生物活性测定:孵化率(≥85%)、卵径(0.8-1.1mm)、卵壳厚度(15-20μm)
5.抗药性监测:LC50值测定(拟除虫菊酯类药剂浓度梯度0.01-10mg/L)
检测范围
1.农林产品:受侵染的松科(油松、马尾松)、壳斗科(栎树)叶片及枝干样本
2.木材制品:原木、板材表面虫孔及蛀屑残留物
3.包装材料:国际运输木质包装中截获的幼虫及蛹体
4.土壤样本:越冬蛹所在土层(深度5-15cm)的温湿度参数
5.植物检疫样本:进出口苗木附着卵块及成虫标本
检测方法
1.形态学鉴定:GB/T35334-2017《林业有害生物形态鉴定技术规范》
2.DNA条形码分析:ISO/IEC17025:2017《分子生物学检测通用要求》
3.寄主关联性验证:ASTME1752-17《昆虫与植物残留物分子匹配标准指南》
4.卵活性测定:GB/T34759-2017《林木害虫卵期检测技术规程》
5.抗药性测试:NY/T3159.3-2018《农药田间药效试验准则》
检测设备
1.体视显微镜:OlympusSZX16(10-110连续变倍,LED环形冷光源)
2.PCR扩增仪:Bio-RadT100ThermalCycler(温控精度0.2℃)
3.超微量分光光度计:ThermoNanoDropOneC(波长范围190-850nm)
4.高速冷冻离心机:Eppendorf5430R(最大转速30,000rpm,温控范围-20℃至40℃)
5.全自动电泳系统:Agilent4200TapeStation(DNA片段分析精度5bp)
6.环境模拟培养箱:BinderKBW系列(温度控制0.5℃,湿度波动≤3%)
7.激光共聚焦显微镜:LeicaTCSSP8(405/488/552/638nm多波长激发)
8.气相色谱质谱联用仪:Agilent8890/5977B(检出限≤0.01μg/g)
9.X射线断层扫描系统:BrukerSkyScan1276(分辨率4μm)
10.全自动酶标仪:TecanInfiniteM200Pro(波长范围230-1000nm)