检测项目

1.磷酸化位点分析：采用HCD碎裂模式检测Ser/Thr/Tyr磷酸化位点覆盖率≥95%，定量精度CV≤15%

2.N-连接糖基化鉴定：解析GlcNAc核心结构及唾液酸末端修饰类型，灵敏度达0.1ng/μL

3.O-GlcNAc修饰定量：基于ETD裂解技术实现单糖基化位点定位精度0.5Da

4.泛素化链型分析：识别K48/K63等多聚泛素链型比例误差≤5%

5.乙酰化动态监测：采用TMT标记定量动态范围1:10000，重复性R≥0.98

检测范围

1.重组蛋白药物：包括单克隆抗体、细胞因子等治疗性生物制品

2.疫苗原液：流感疫苗糖蛋白抗原表位完整性验证

3.诊断试剂核心蛋白：化学发光标记抗体的糖型一致性分析

4.基因编辑工具酶：CRISPR相关蛋白的活性中心修饰状态评估

5.细胞治疗产品：CAR-T细胞表面受体的糖基化异质性检测

检测方法

1.ISO18472:2018生物制品翻译后修饰表征指南

2.ASTME3066-18质谱法测定蛋白质糖基化标准流程

3.GB/T39139-2020重组蛋白药物质量控制的修饰分析要求

4.USP<1234>生物治疗产品糖型分析方法验证规范

5.GB/T38165-2019磷酸化蛋白质组学检测技术通则

检测设备

1.ThermoOrbitrapFusionLumos：配备ETD源的超高分辨质谱仪（分辨率450,000@m/z200）

2.Agilent1260InfinityIIHPLC：二元梯度系统（压力范围0-600bar）

3.WatersACQUITYUPLCH-ClassBio：配备BEH300C4色谱柱（1.7μm,2.1150mm）

4.BrukertimsTOFPro2：4D蛋白质组学平台（碰撞截面分辨率＞200）

5.SCIEXTripleTOF6600：SWATH全息采集模式（扫描速度100Hz）

6.ShimadzuNexeraMX：双流路超高效液相系统（温控精度0.1℃）

7.DionexICS-6000：高效阴离子交换色谱（脉冲安培检测器）

8.MalvernPanalyticalZetasizerPro：动态光散射仪（粒径检测范围0.3nm-10μm）

9.GEHealthcareKTApure25：蛋白质纯化系统（UV280/260双波长监测）

10.ProteinSimpleMaurice：全自动毛细管电泳仪（等电聚焦分辨率0.01pH）