检测项目
1.成虫形态特征:体长4.5-6.0mm,翅展10-14mm;前翅灰褐色斑纹分布模式;后翅缘毛长度0.3-0.5mm
2.幼虫头壳宽度:末龄幼虫头壳宽度≥1.2mm;前胸背板骨化区L1毛间距≤0.08mm
3.DNA条形码检测:线粒体COI基因658bp扩增;引物序列LepF1(5'-ATTCAACCAATCATAAAGATATTGG-3')/LepR1(5'-TAAACTTCTGGATGTCCAAAAAATCA-3')
4.性信息素成分分析:(E,E)-8,10-Dodecadien-1-ylacetate含量≥95%,气相色谱保留时间12.30.2min
5.危害特征鉴定:蛀道直径0.8-1.5mm;韧皮部取食斑面积≥15mm
检测范围
1.寄主植物样本:苦楝(Meliaazedarach)、樱桃(Prunusspp.)等蔷薇科/楝科植物茎干及果实
2.虫体样本:各发育阶段虫体(卵/幼虫/蛹/成虫)
3.土壤样本:树干基部半径50cm范围内表层土(0-20cm深度)
4.农产品检疫:木材制品(含水率≤20%)、鲜果包装材料
5.跨境运输物:木质托盘、集装箱内壁残留物
检测方法
1.形态学鉴定:依据GB/T35335-2017《林木害虫形态鉴定技术规程》进行体视显微镜(40)观测
2.分子生物学检测:参照ISO/IEC17025:2017建立PCR扩增体系(退火温度52℃0.5℃)
3.化学分析:ASTME260-96(2019)标准气相色谱程序,DB-WAX毛细管柱(30m0.25mm0.25μm)
4.危害评估:GB/T29577-2013《检疫性有害生物风险分析准则》建立分级判定矩阵
5.标本制备:ISO21748:2017指导制作永久玻片标本(加拿大树胶封片)
检测设备
1.OlympusBX53研究级显微镜:配备DP27数码成像系统,最大放大倍数1000
2.Bio-RadT100ThermalCycler:支持梯度PCR程序,温控精度0.1℃
3.Agilent7890B/5977BGC-MS:质量扫描范围10-800amu,EI离子源温度230℃
4.MettlerToledoXS205电子天平:称量精度0.01mg,符合ISO9001:2015标准
5.LeicaCM1950冷冻切片机:切片厚度调节范围1-100μm,温度控制范围-50℃~+60℃
6.ThermoScientificNanoDropOneC紫外分光光度计:核酸浓度测量范围2-27,500ng/μL
7.EppendorfCentrifuge5430R:最大转速15,000rpm,配备角转子和水平转子
8.MemmertIPP110培养箱:温度控制范围+5℃~+70℃,波动度0.3℃
9.SartoriusMilli-QIQ7003超纯水系统:产水电阻率18.2MΩcm@25℃
10.ZeissStemi508体视显微镜:变倍比8:1,最大工作距离115mm