可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型典型应用场景主要检测项目常用方法 / 参考
细菌菌株（芽孢杆菌属、假单胞菌属）根际促生菌筛选、生物肥料功能菌选育产IAA定性筛选、发酵液IAA定量、比产率、产IAA发酵动力学加L-色氨酸培养基振荡培养；Salkowski比色法初筛；HPLC定量确证；GB/T 41727-2022功能评价框架
放线菌菌株（链霉菌属）生物农药与生物肥效功能菌开发产IAA定量、传代产素稳定性、菌落形态与产素水平关联高盐LBS培养基加前体培养；530nm比色定量；色谱确证
真菌菌株（木霉属、曲霉属）生物防治制剂、促生真菌研究发酵液IAA浓度、菌丝生长与产素曲线、吲哚类副产物筛查马铃薯葡萄糖培养基加前体培养；HPLC分离定量
酵母菌株农用酵母制剂、发酵添加剂开发IAA合成量、菌体量关联比产率、耐酸耐盐性能YPD加前体培养；比色定量；液质联用确证
复合微生物菌剂成品微生物肥料质量评价、功能菌验收功能菌产IAA水平、有效活菌数、杂菌率、霉菌菌落总数NY/T 2321-2013检验规程；NY/T 798-2015；GB 20287-2006指标体系
工程改造菌株合成生物学色氨酸代谢途径优化IAA产量、色胺与吲哚醛副产物谱、传代产素稳定性LC-MS/MS绝对定量；连续传代培养追踪

检测项目

1. 产IAA定性筛选：培养基添加L-色氨酸100~500mg/L，28℃振荡培养48~72h，取上清经Salkowski试剂显色呈粉红色判为阳性

2. IAA比色定量：线性范围0.1~100μg/mL，530nm波长测定，检出下限约0.5μg/mL，平行样相对偏差要求不超过10%

3. IAA色谱定量：C18反相柱280nm紫外或荧光检测，线性范围0.01~10μg/mL，加标回收率80%~110%，保留时间定性偏差不超过0.1min

4. 比产率：以μg IAA/(mL·OD600)表示，消除菌体量差异，评价单位菌体的合成效率，用于不同菌株横向比较

5. 产IAA能力分级：发酵液终浓度大于50μg/mL为高产，20~50μg/mL为中产，20μg/mL以下为低产，分级结论需三次独立重复培养验证

检测范围

1. 芽孢杆菌属：枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌

2. 假单胞菌属：荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、绿针假单胞菌

3. 链霉菌属：灰色链霉菌、淡紫灰链霉菌、吸水链霉菌

4. 真菌类：哈茨木霉、绿色木霉、黑曲霉、酿酒酵母

5. 根瘤菌与固氮菌：大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、褐球固氮菌

6. 成品菌剂：农用微生物菌剂、复合微生物肥料、生物有机肥功能菌

检测方法

1. GB/T 41727-2022 农用微生物菌剂功能评价技术规范

2. GB 20287-2006 农用微生物菌剂

3. NY/T 2321-2013 微生物肥料产品检验规程

4. NY/T 798-2015 复合微生物肥料

5. GB/T 27025-2019 检测和校准实验室能力的通用要求

6. GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求

7. 经典Salkowski比色法：发酵上清与FeCl3-硫酸显色剂反应30min后530nm比色定量（吲哚乙酸测定暂无专属国标，方法学按文献经典方法执行）

8. HPLC-UV/FLD法：C18柱分离、外标法定量，适用于含吲哚类干扰物的复杂基质确证

检测设备

1. 紫外可见分光光度计：波长范围190~1100nm，530nm比色测定，波长精度±0.5nm

2. 高效液相色谱仪：四元低压梯度泵，流速0.001~10mL/min，柱温30~40℃，配紫外检测器与荧光检测器

3. 液质联用仪：三重四极杆质谱，ESI电离，MRM模式监测m/z 176→130，定量下限约0.001μg/mL

4. 恒温振荡培养箱：温控4~60℃（精度±0.5℃），转速20~300rpm，用于菌株产素发酵培养

5. 生物安全柜：洁净度ISO 5级，用于菌株活化、转接与保藏操作

6. 高速冷冻离心机：最高转速20000rpm，温控-20~40℃，用于发酵上清收集

7. 酶标仪：波长400~750nm，支持96孔板高通量定性初筛

8. 精密pH计：量程0.00~14.00pH，精度±0.01pH，培养基与发酵液酸度监控

9. 电子分析天平：量程0~220g，读数精度0.1mg，标准品与培养基组分称量

10. 超低温保存箱：-86℃，工作菌株甘油管长期保藏