检测项目

1.病原菌形态学鉴定：孢子直径（18-25μm）、表面纹饰（网状突起）、萌发孔数量（1-3个）

2.ITS序列分析：rDNA-ITS区域扩增（引物ITS1/ITS4）、序列比对（NCBI数据库相似度≥99%）

3.孢子萌发率测定：温度梯度培养（15-30℃）、湿度控制（RH≥85%）、时间参数（24-72h）

4.寄主特异性测试：接种试验（早熟禾属植物10种）、病症观察周期（14-21天）

5.抗药性基因筛查：β-tubulin基因突变位点（E198A/F200Y）、实时荧光定量PCR阈值（Ct≤35）

检测范围

1.草坪草种子：早熟禾属（Poapratensis/Poatrivialis）商业种子批

2.植株病样：叶片条纹病斑组织（长度＞2cm）、穗部黑粉孢子堆

3.土壤样本：根际土壤（深度0-20cm）、越冬孢子浓度（≥10^3CFU/g）

4.草料制品：干草捆含水量（12-18%）、青贮饲料pH值（4.0-5.5）

5.科研样本：模式植物突变体、转基因材料保藏菌株

检测方法

1.ISO17025:2017《真菌孢子显微测量规范》：孢子尺寸测量误差≤0.5μm

2.ASTMD7788-14《植物病原真菌分子检测指南》：DNA提取纯度要求A260/A280=1.8-2.0

3.GB/T3543.5-2020《农作物种子检验规程病害检验》：病斑分级标准（0-4级）

4.SN/T2966-2011《植物病原真菌实时荧光PCR检测方法》：扩增效率90-110%

5.NY/T3088-2017《草坪草病害诊断技术规程》：症状比对图谱库包含12种相似病害