检测项目

1.活菌数测定：采用平板计数法（CFU/g）或流式细胞术（≥10^6CFU/g）

2.菌种纯度鉴定：16SrRNA基因序列相似度≥99%，杂菌率≤0.1%

3.代谢产物分析：乙酸/乳酸摩尔比（1.5-2.0），短链脂肪酸总量≥50μmol/g

4.耐药性测试：对氨苄西林（MIC≥8μg/mL）、万古霉素（MIC≥16μg/mL）的耐受性

5.基因序列鉴定：特异性引物Bifid-F（5'-GATTCTGGCTCAGGATGAAC-3'）扩增验证

检测范围

1.益生菌制剂（片剂/胶囊/粉剂）

2.发酵乳制品（酸奶/奶酪/乳饮料）

3.婴幼儿配方食品原料

4.药品原料及微生物治疗剂

5.动物饲料添加剂

检测方法

ISO20128:2006《乳制品中双歧杆菌计数》

GB4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌检验》

ISO29981:2010《发酵乳制品中双歧杆菌选择性计数》

GB/T34224-2017《饲料添加剂饲用微生物制剂中双歧杆菌的测定》

ASTMD6868-17《分子生物学方法鉴定微生物的标准指南》

检测设备

1.ThermoScientificHerathermIGS180微生物培养箱（温度精度0.1℃）

2.Agilent1260InfinityIIHPLC系统（短链脂肪酸定量分析）

3.Bio-RadCFX96Touch实时荧光定量PCR仪（16SrRNA基因扩增）

4.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪（活菌快速计数）

5.IlluminaMiSeq测序平台（全基因组序列分析）

6.SartoriusCubisMCA225S分析天平（称量精度0.01mg）

7.Eppendorf5430R高速冷冻离心机（最大转速30,000rpm）

8.BDBACTECFX40全自动血培养系统（杂菌污染监测）

9.MalvernMastersizer3000激光粒度仪（菌体粒径分布测定）

10.MettlerToledoSevenExcellencepH计（培养基pH值校准）