检测项目
1.结合亲和力(Kd):测定范围1nM-100μM,精度5%
2.解离速率常数(koff):量程0.001-10s⁻,分辨率0.0001s⁻
3.构象变化幅度:采用圆二色光谱法测量α螺旋含量变化(190-260nm)
4.热力学参数:焓变(ΔH)200kJ/mol,熵变(ΔS)600J/(molK)
5.动态结合位点分析:氢氘交换质谱(HDX-MS)覆盖率≥95%
检测范围
1.蛋白质-小分子复合物:激酶抑制剂/GPCR配体等药物靶点
2.核酸适配体-靶标复合物:凝血因子/肿瘤标志物等诊断试剂
3.酶-底物过渡态复合物:水解酶/转移酶催化机制研究
4.抗体-抗原动态结合:IgG/IgM类治疗性抗体开发
5.膜蛋白-配体系统:离子通道/转运蛋白构象调控分析
检测方法
ASTME3074-21表面等离子体共振(SPR)动力学分析标准
ISO15197:2013生物传感器法测定分子互作技术规范
GB/T34814-2017等温滴定量热法(ITC)测试规程
GB/T39145-2020荧光共振能量转移(FRET)定量分析方法
ISO/IEC17025:2017氢氘交换质谱法(HDX-MS)验证指南
检测设备
BiacoreT200:表面等离子体共振仪,支持多通道实时动力学监测
MicroCalPEAQ-ITC:等温滴定量热仪,灵敏度0.1μcal/sec
JascoJ-1500:圆二色光谱仪,波长范围163-2500nm
WatersSYNAPTG2-Si:高分辨质谱仪,HDX-MS时间分辨率10ms
NanoTemperMonolithX:微量热泳动仪(MST),样品量需求4μL
MalvernPanalyticalLitesizer™500:动态光散射仪(DLS),粒径检测范围0.3nm-10μm
AgilentCaryEclipse:稳态荧光光谱仪,扫描速度2400nm/min
BrukerAvanceIIIHD:核磁共振波谱仪(NMR),磁场强度800MHz
SartoriusOctetRED384:生物层干涉仪(BLI),并行检测32通道
PerkinElmerLambda365:紫外可见分光光度计,波长精度0.1nm