检测项目

1.病原菌分离鉴定：包括菌落形态观察（直径0.8-1.5mm/24h）、分生孢子测量（尺寸12-183-4μm）、ITS基因序列比对（相似度≥99%）

2.菌丝密度测定：采用显微计数法（分辨率0.1μm），活菌数≥110⁶CFU/g为阳性阈值

3.孢子活性检测：萌发率测试（25℃/RH≥85%条件下24h萌发率＞70%）

4.土壤pH值测定：电极法（测量范围0-140.01pH）

5.抗药性试验：苯醚甲环唑EC50值测定（浓度梯度0-100mg/L）

检测范围

1.青冈树病株样本：叶片（黄化部位）、根系（直径≤5mm细根）

2.林区表层土壤：深度0-30cm土层样本

3.腐殖质层物质：分解度Ⅲ级以上的腐殖质

4.周边伴生植物：栎属、栗属等壳斗科植物根系

5.灌溉水源样本：地表径流水体（过滤孔径0.45μm）

检测方法

1.ISO21427-1:2006《水质-微生物分析-第1部分》用于水体孢子分离

2.ASTMD5988-12《土壤中微生物活性测定标准指南》规范菌丝培养

3.GB/T15618-2018《土壤环境质量农用地土壤污染风险管控标准》指导pH测定

4.GB/T35818-2018《林业检疫性病害监测技术规程》规定取样流程

5.SN/T1840-2016《植物病原真菌分子检测规范》用于基因测序分析

检测设备

1.PCR仪（ABI7500）：ITS基因扩增（温度精度0.1℃）

2.生物显微镜（OlympusBX53）：孢子形态观察（放大倍数1000）

3.冷冻离心机（Eppendorf5430R）：核酸提取（最大转速30,000rpm）

4.恒温培养箱（MemmertIPP110）：菌株培养（控温范围4-60℃0.5℃）

5.pH计（METTLERTOLEDOSevenExcellence）：土壤酸碱度测定（分辨率0.001pH）

6.超净工作台（ESCOAirstreamClassII）：无菌操作（洁净度ISO5级）

7.凝胶成像系统（Bio-RadChemiDocMP）：电泳分析（像素密度3.4M）

8.实时荧光定量系统（RocheLightCycler480）：抗药基因表达分析

9.冷冻干燥机（LabconcoFreeZone2.5L）：样本预处理（真空度≤0.05mbar）

10.超低温冰箱（ThermoScientificTSX600）：菌种保藏（温度-86℃3℃）