检测项目
1.形态学特征:体长测量范围15.8-22.3mm0.02mm精度;后足胫节长度4.5-6.2mm;前翅长/宽比2.8:1-3.2:1
2.基因序列分析:线粒体COI基因658bp扩增;ITS1区段GC含量42-45%;微卫星位点SSR-03/SSR-07多态性检测
3.病原微生物筛查:绿僵菌(Metarhiziumacridum)孢子浓度≥110^8CFU/g;微孢子虫(Nosemalocustae)PCR检出限10copies/μL
4.抗药性测试:马拉硫磷LC50值测定范围0.05-5.00mg/L;溴氰菊酯KT50值≤30min判定标准
5.生理生化指标:血淋巴蛋白浓度18-22mg/mL;几丁质酶活性≥35U/mgh
检测范围
1.田间植物样本:玉米/小麦叶片残留物(单叶虫卵≥3粒需复检)
2.土壤样本:深度0-15cm土层幼虫/蛹检出(取样密度5点/公顷)
3.昆虫标本:成虫保存时间≤24个月(75%乙醇固定)
4.农药残留物:有机磷类代谢产物氧乐果检出限0.01mg/kg
5.跨境货物包装:木质材料虫孔直径≥2mm需重点筛查
检测方法
ISO21469:2018《昆虫标本DNA提取规范》规定CTAB法提取温度65℃1℃
ASTMD7663-12(2020)采用气相色谱-质谱联用测定表皮碳氢化合物组分
GB/T27639-2011规定体视显微镜下观察产卵器齿突数量(正常值14-16个)
NY/T3424-2019要求实时荧光定量PCR仪循环阈值Ct≤35判定阳性
AOACOfficialMethod2020.09规定酶联免疫法测定保幼激素滴度
检测设备
LeicaM205C体视显微镜:20.5:1变倍比,LED冷光源观察口器结构
ThermoScientificNicoletiS20傅里叶红外光谱仪:4cm^-1分辨率测定表皮脂质成分
Agilent7890B-5977AGC-MS系统:DB-5MS色谱柱分析信息素组成
Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪:六通道检测微孢子虫SSUrRNA基因
SartoriusCP225D电子天平:0.01mg精度称量血淋巴样本
LabconcoFreeZone2.5L冷冻干燥机:-50℃条件下处理蛋白质样品
HitachiSU3500扫描电镜:15kV加速电压观察触角感器形态
PerkinElmerLambda365紫外分光光度计:测定几丁质酶在280nm吸光度
BinderKB115培养箱:28℃0.5℃恒温培养绿僵菌菌落
HamiltonMICROLABSTARlet液体工作站:自动加注农药梯度浓度溶液