检测项目
1.病毒核酸检测：采用荧光定量RT-PCR技术，检测ORF5基因保守区段（Ct值≤38为阳性）
2.血清抗体效价测定：ELISA法测定IgG抗体浓度（OD450≥0.6判定阳性）
3.病毒抗原快速筛查：胶体金试纸条检测GP3蛋白（T/C线显色时间≤15分钟）
4.病毒分离培养：Marc-145细胞系接种观察CPE病变（72小时判定结果）
5.中和抗体测定：微量中和试验（中和效价≥1:16为保护性抗体）
检测范围
1.猪/牛/羊血清样本（采集量≥2ml/份）
2.动物组织样本（脾脏/淋巴结/肺脏等器官）
3.疫苗产品（灭活苗/弱毒苗/基因工程苗）
4.细胞培养物（接毒后3代以内传代细胞）
5.环境拭子（养殖场设施表面采样面积1010cm）
检测方法
1.ISO16140-3:2021《分子生物学方法验证规范》
2.GB/T35911-2018《伪狂犬病诊断技术》
3.ASTME2888-19《兽医诊断试剂盒性能评估标准》
4.OIETerrestrialManualChapter3.8.2（2023版）
5.GB/T22917-2008《病毒分离与鉴定通则》
检测设备
1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（温度精度0.1℃）
2.BioTekELx808全自动酶标仪（波长范围400-750nm）
3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机（最大转速15000rpm）
4.MemmertCO₂培养箱（温度波动度0.3℃）
5.OlympusCKX53倒置显微镜（400相衬观察）
6.SartoriusQuintix224-1CN分析天平（精度0.1mg）
7.HamiltonMicrolabSTARlet液体工作站（移液精度1%）
8.MiltenyiBiotecGentleMACS组织匀浆仪（程序化裂解模式）
9.RocheLightCycler480II核酸扩增系统（六色荧光通道）
10.ThermoScientificHeracellVIOS160i生物安全柜（A2型双HEPA过滤）