检测项目

1.直接镜检：采用10%KOH溶液处理样本后观察菌丝/孢子形态，检出限≥3个菌丝/视野

2.真菌培养：使用沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)，培养温度281℃，观察周期21天

3.分子生物学检测：18SrRNA基因扩增(引物ITS1/ITS4)，扩增产物长度500-700bp

4.药敏试验：微量稀释法测定MIC值(氟康唑/伊曲康唑/特比萘芬)，浓度梯度0.03-16μg/mL

5.组织病理学检查：PAS染色观察甲板内菌丝分布密度(分级标准0-3+)

检测范围

1.指甲刮片样本：远端甲下型感染患者游离缘刮取物

2.甲下碎屑样本：近端甲下型感染患者甲母质区域采集物

3.病变组织标本：全甲毁损型患者手术切除甲板组织

4.分泌物样本：合并甲沟炎患者的脓性分泌物

5.环境样本：疑似污染源的洗脱液或擦拭样

检测方法

1.CLSIM38-A2《丝状真菌药敏试验参考方法》

2.ISO17025《医学实验室真菌鉴定技术要求》

3.GB/T38502-2020《病原微生物实验室生物安全通用准则》

4.WS/T497-2017《侵袭性真菌病临床实验室诊断操作指南》

5.ASTME1873-21《临床标本中真菌的分离与鉴定标准指南》

检测设备

1.OlympusBX53显微镜：配备400油镜及微分干涉对比功能

2.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪：支持熔解曲线分析功能

3.ThermoScientificHeracell150iCO₂培养箱：温度波动0.5℃

4.BiomerieuxVITEKMS质谱仪：MALDI-TOF技术鉴定菌种

5.SiemensADVIACentaurXP化学发光仪：G试验(1,3-β-D葡聚糖)定量检测

6.EppendorfCentrifuge5430R：最大转速15,000rpm的冷冻离心机

7.ThermoScientificNunc细胞培养瓶：表面改性处理SDA培养基专用

8.BioTekSynergyH1酶标仪：支持450nm/630nm双波长读取模式

9.LeicaRM2235切片机：制备5μm厚甲组织病理切片

10.MemmertINCO153恒温摇床：振荡培养温度控制0.2℃