检测项目
1.成虫形态特征鉴定:体长2.5-4.5mm,中胸背板灰褐色无斑纹,腹节背板基部具白色横带
2.基因序列比对:COI基因片段扩增(658bp),与NCBI数据库BLAST比对相似度≥98%
3.抗药性监测:乙酰胆碱酯酶(AChE)活性测定(抑制率≤70%判定敏感),击倒抗性基因kdr突变位点筛查
4.病原体携带检测:西尼罗病毒(WNV)RT-PCR扩增(引物序列WNV-F:5'-CAGACCACGCTACGGC-3')
5.环境适应性评估:幼虫发育周期(25℃条件下≤7天)、成蚊耐低温阈值(-5℃存活率≤10%)
检测范围
1.野外采集的成蚊及幼虫样本(含孳生地水体标本)
2.实验室保种的白顶库蚊种群(F1-F3代)
3.市售杀虫剂产品(拟除虫菊酯类/有机磷类)药效测试样本
4.城市下水道系统蚊虫密度监测样本
5.公共卫生应急响应中的疑似病媒传播事件标本
检测方法
1.形态学鉴定:依据GB/T23797-2009《蚊虫分类与鉴定技术规范》进行体视显微镜观察
2.分子生物学检测:采用ISO/IEC17025:2017标准进行DNA提取(QiagenDNeasy试剂盒)及PCR扩增
3.抗药性测试:参照WHO/CDS/CPC/MAL/98.12《蚊虫抗药性生物测定方法》进行接触筒法实验
4.病毒分离培养:执行WS/T771-2021《虫媒病毒分离与鉴定标准》Vero细胞培养法
5.代谢酶活性测定:依据ASTME2316-14《昆虫乙酰胆碱酯酶活性分光光度测定法》操作
检测设备
1.OlympusCX43体视显微镜(6.7-45连续变倍,LED冷光源系统)
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(支持TaqMan探针法)
3.Agilent4200TapeStation系统(DNA/RNA完整性评估,RIN值≥7.0)
4.WHO标准接触筒装置(内径12cm高25cm有机玻璃筒)
5.PerkinElmerLambda365紫外分光光度计(波长范围190-1100nm)
6.MemmertIPP110恒温培养箱(温度控制精度0.3℃)
7.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(最大转速30,000rpm)
8.SartoriusCP225D电子分析天平(称量精度0.01mg)
9.Bio-RadChemiDocMP成像系统(化学发光/荧光多模式检测)
10.ESCOAC2-4S1生物安全柜(二级A2型,30%排气循环)