检测项目

1.霍乱弧菌分离培养：使用TCBS琼脂培养基（pH8.60.2），37℃培养18-24小时

2.O1/O139血清群凝集试验：采用多价诊断血清（效价≥1:80）进行玻片凝集

3.ctxAB毒素基因检测：实时荧光PCR（Ct值≤35为阳性）

4.溶血素基因(hlyA)筛查：常规PCR扩增（产物大小471bp）

5.抗生素敏感性试验：纸片扩散法测定对四环素（30μg）、环丙沙星（5μg）等12种药物的MIC值

检测范围

1.临床样本：急性期患者粪便（≥1g）、呕吐物（≥5ml）及直肠拭子

2.水样标本：地表水/饮用水（滤膜法浓缩1000ml）及污水样本

3.食品基质：贝类海产品（25g匀浆液）、即食食品及冷链运输样品

4.环境样本：医疗场所门把手（1010cm采样面积）及污水管网沉积物

5.生物制品：疫苗生产用菌株（CT值偏差≤1.5）及诊断试剂质控品

检测方法

ISO7899-2:2000水质-肠道致病菌检测-霍乱弧菌富集法

GB15984-2011霍乱诊断标准及处理原则

WS289-2018霍乱诊断（实时荧光PCR法）

SN/T1870-2016出口食品中霍乱弧菌检验方法

CLSIM45-A3需氧菌抗菌药物敏感性试验执行标准

检测设备

1.BSL-Ⅱ生物安全柜（ThermoScientific1300系列A2型）：样本前处理核心设备

2.实时荧光定量PCR仪（ABI7500Fast）：ctxAB基因定量分析

3.全自动微生物鉴定系统（VITEK2Compact）：细菌ID与药敏分析

4.凝胶成像系统（Bio-RadGelDocXR+）：电泳结果判读

5.恒温培养箱（MemmertIN260）：37℃1℃精准控温培养

6.高速冷冻离心机（Eppendorf5430R）：最大转速30,000rpm

7.膜过滤装置（MilliporeXX4504700）：水样浓缩预处理

8.全自动酶标仪（TecanInfiniteM200Pro）：ELISA法抗体检测

9.-80℃超低温冰箱（HaierDW-86L628）：菌种保藏设备

10.生物分子相互作用仪（BiacoreX100）：毒素蛋白亲和力分析