检测项目

1.病原菌分离培养：Sepobasidiumspp.菌落形态特征（直径≥3mm）、产孢结构显微观测（担孢子尺寸8-123-4μm）

2.孢子悬浮液浓度测定：分生孢子计数≥110⁶CFU/mL，活体染色法存活率≥85%

3.菌丝生长速率分析：PDA培养基25℃培养日均扩展直径2.5-3.8mm

4.分子生物学鉴定：ITS序列扩增（引物ITS1/ITS4），PCR产物长度550-600bp

5.侵染强度分级：病斑面积占比≤5%（Ⅰ级）至≥50%（Ⅴ级）五级分类

检测范围

1.柑橘类果树叶片及枝干样本（包括脐橙、蜜柑等）

2.核果类果树病组织（桃树、李树主干分杈处）

3.经济作物茎秆（茶树三年生以上老枝）

4.土壤基质样本（根际土有机质含量≥2%）

5.灌溉水体微生物负载量（过滤膜孔径0.45μm）

检测方法

1.ISO21527-2:2008《真菌孢子计数与活性测定规范》

2.GB/T36852-2018《植物病原真菌分离培养技术规程》

3.ASTMD7786-12《环境样品DNA提取与纯化标准指南》

4.ISO22174:2005《食品链微生物学-分子生物学检测通用要求》

5.GB/T19495.6-2018《转基因产品检测核酸定量PCR方法》

检测设备

1.奥林巴斯BX53研究级显微镜：配备DP27摄像系统，400油镜观测孢子形态

2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪：支持TaqMan探针法绝对定量

3.MemmertIPP110培养箱：温度控制精度0.3℃，湿度范围30-95%RH

4.Sartorius纯水系统（型号：ariumproVF）：产水电阻率18.2MΩcm

5.EppendorfCentrifuge5910Ri高速冷冻离心机：最大转速21,330g

6.BioTekSynergyH1酶标仪：支持荧光/光吸收双模式读数

7.LeicaCM1950冷冻切片机：样本切片厚度5-30μm可调

8.MettlerToledoXSR205DU分析天平：称量精度0.01mg/0.1mg

9.ESCOAC2-4S1生物安全柜：HEPA过滤器效率99.99%@0.3μm

10.Milipore微生物限度检测系统（型号：MilliflexQuantum）：集菌培养一体化操作