检测项目
1.虫体形态特征测量:体长(0.9-2.1mm)、触角节数(6节)、腹管长度(0.12-0.15mm)、尾片形态(圆锥形)
2.DNA条形码分析:COI基因序列(658bp)、ITS1区域扩增(300-400bp)、18SrRNA比对(V4-V9区)
3.种群密度测定:单位面积虫口数(头/㎡)、若蚜/成蚜比例(≤3:1)、有翅蚜占比(≥5%预警值)
4.抗药性基因筛查:E4/FE4酯酶活性(≥3.0nmol/min/mg)、kdr突变位点(L1014F/V)
5.寄主植物特异性验证:唾液鞘形成时间(≤30min)、取食行为电信号(EPG波形分析)
检测范围
1.黍类作物:糜子、稷子等田间植株茎叶样本
2.禾本科杂草:狗尾草、稗草等野生寄主植物
3.仓储粮食:玉米、小麦等籽粒携带虫体筛查
4.土壤样本:越冬卵密度检测(0-20cm土层)
5.植物检疫样品:进出口种苗的蚜虫携带风险评估
检测方法
1.ISO21571:2005分子生物学检测通用标准
2.GB/T28084-2011蚜虫抗药性监测技术规范
3.ASTME1752-17昆虫形态学鉴定标准方法
4.GB/T31749-2015农作物害虫种群密度调查规范
5.ISO16578:2020实时荧光定量PCR检测通则
检测设备
1.OlympusBX53生物显微镜:配备DP27数码相机,支持400显微测量
2.Bio-RadT100ThermalCycler:梯度PCR仪,温度精度0.1℃
3.Agilent4200TapeStation系统:DNA/RNA完整性分析(DIN≥7.0)
4.WACOCG-4100昆虫行为分析仪:EPG信号采集频率100Hz
5.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:吸光度测量范围0-4OD
6.LeicaM205C体视显微镜:20.5:1变焦比,DFC450摄像头
7.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:13色激光配置
8.SartoriusCP225D电子天平:称量精度0.01mg
9.EppendorfCentrifuge5430R:最大转速15,300rpm
10.IlluminaMiSeq测序平台:2300bp双端测序模式