检测项目
1.病毒核酸定量检测：采用qPCR测定BmNPV基因组DNA拷贝数（灵敏度≥10copies/μL）
2.包涵体形态学分析：扫描电镜观测多角体尺寸（1.5-3.0μm）及晶格结构完整性
3.病毒蛋白表达量测定：ELISA定量GP64蛋白浓度（检测限0.1ng/mL）
4.宿主血淋巴酶活性检测：测定酚氧化酶活性（U/mgprot）及超氧化物歧化酶（SOD）活力变化
5.病理组织切片分析：石蜡切片HE染色观察中肠上皮细胞核病变程度（≥200个视野统计）
检测范围
1.家蚕卵表面病毒载量筛查
2.幼虫期血淋巴样本病原检测
3.蛹期组织器官病毒扩散监测
4.成虫交配传播风险评估
5.蚕丝制品残留病毒灭活验证
检测方法
ISO21771:2020《昆虫病毒核酸检测通用规范》qPCR扩增程序
GB/T36851-2018《家蚕微粒子病和核型多角体病诊断技术规程》显微观察标准
ASTME3066-2016《昆虫病原体灭活效果评估指南》热灭活验证方法
GB/T34742-2017《蚕种检疫规程》卵壳表面消毒效果评价
ISO21527-2:2008《真菌和病毒计数》包涵体密度测定法
检测设备
1.QuantStudio7Flex实时荧光定量PCR仪（ThermoFisher）：支持TaqMan探针法绝对定量
2.SU8010场发射扫描电镜（Hitachi）：5nm分辨率观测包涵体表面结构
3.MultiskanSkyHigh酶标仪（ThermoFisher）：96孔板GP64蛋白ELISA读数
4.RM2235轮转式切片机（Leica）：制备5μm厚度病理组织切片
5.CX43生物显微镜（Olympus）：400倍率观察HE染色切片病变特征
6.5417R高速冷冻离心机（Eppendorf）：15,000g分离血淋巴样本
7.NanoDropOne超微量分光光度计（ThermoFisher）：DNA纯度A260/A280比值测定
8.BSC-1500IIA2生物安全柜（海尔）：BSL-2级病原操作防护
9.MDF-382E超低温冰箱（Panasonic）：-80℃长期保存病毒样本
10.AutoclaveMLS-3780高压灭菌器（Sanyo）：121℃处理感染性废弃物