检测项目
1.病原分离培养:采用罗氏培养基/Lwenstein-Jensen培养基,37℃培养8-12周
2.PCR核酸检测:靶向IS6110插入序列/16SrRNA基因,扩增产物长度245bp/540bp
3.ELISA抗体检测:使用MPB70/MPB83特异性抗原包被板
4.病理组织学检查:Ziehl-Neelsen抗酸染色镜检(100油镜)
5.结核菌素皮内试验:0.1mL禽型PPD注射后24-72小时观察反应
检测范围
1.病禽肝/脾组织样本(含肉芽肿病变)
2.粪便/呼吸道分泌物排泄物
3.全血/血清样本(抗凝血需EDTA-K2处理)
4.养殖场土壤/垫料环境样本
5.禽类加工产品(蛋/肉制品)
检测方法
1.OIE《陆生动物诊断试验手册》第3.9.3章病原分离法
2.ISO17025:2017《检测和校准实验室能力通用要求》
3.GB/T14926.50-2001《实验动物结核分枝杆菌检测方法》
4.SN/T1223-2015《禽结核病检疫技术规范》
5.ASTMF2312-11《动物源性材料中分枝杆菌检测标准指南》
检测设备
1.ThermoScientificForma系列CO2培养箱(型号3111),温度精度0.1℃
2.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪(96孔模块)
3.LeicaDM500光学显微镜(配备油镜及数码成像系统)
4.ThermoMultiskanFC酶标仪(波长范围340-850nm)
5.EppendorfCentrifuge5810R高速冷冻离心机(最大转速14,000rpm)
6.MiltenyiBiotecGentleMACS组织匀浆器(程序号M_Tuberculosis)
7.Sartorius纯水系统(电阻率18.2MΩcm@25℃)
8.Esco生物安全柜A2型(风速0.380.025m/s)
9.PanasonicMCO-20AIC恒温恒湿箱(湿度控制范围30-95%RH)
10.HamiltonMicrolabSTARlet液体工作站(加样精度1%)