检测项目
1.病原菌种类鉴定:ITS序列分析(引物ITS1/ITS4),rDNA-ITS区段扩增(退火温度52℃0.5)
2.孢子浓度测定:血球计数板法(0.1mm深度),分生孢子悬浮液(10^3-10^6CFU/mL)
3.侵染活性评估:离体叶片接种试验(温度221℃,湿度≥90%)
4.菌丝生长速率:PDA培养基平板培养(日增长量0.5-2.3mm/d)
5.木质部褐变指数:色差仪测定(L*a*b*值偏差ΔE≥15判定阳性)
检测范围
1.桦木原材:含水率8-12%的锯材及圆木(直径≥15cm)
2.加工板材:厚度10-50mm的旋切单板/刨切薄木
3.木制品:实木家具构件(榫接部位重点检测)
4.活体植株:树龄5年以上桦树主干(取样高度1.3m处)
5.土壤基质:根系分布层土壤(深度20-40cm)
检测方法
1.ISO17089-1:2019《木材病害诊断-分子生物学检测规程》
2.ASTMD7787-13《木材腐朽真菌实验室培养标准指南》
3.GB/T29885-2013《木材有害生物鉴定技术规范》
4.GB/T34742-2017《林木病害检疫鉴定方法》
5.ISO21527-2:2008《真菌孢子计数与活力测定》
检测设备
1.实时荧光定量PCR仪(ABI7500):真菌DNA定量分析
2.激光共聚焦显微镜(LeicaTCSSP8):菌丝三维结构重建
3.超低温冷冻离心机(ThermoSorvallX1R):孢子悬浮液制备
4.恒温恒湿培养箱(BinderKBF720):菌株标准化培养
5.X射线断层扫描系统(BrukerSkyScan1272):木质部内部病变分析
6.全自动酶标仪(BioTekSynergyH1):真菌代谢产物定量
7.超纯水系统(MerckMilli-QIQ7000):分子实验用水制备
8.生物安全柜(ESCOAirstreamACB-4E):病原体安全操作
9.冷冻干燥机(LabconcoFreeZone12L):菌种长期保存处理
10.便携式树木雷达(TRU树木雷达PiCUS3):活体病害无损探测