检测项目
1.虫体形态学鉴定:测量雌成虫体长(1.5-4.0mm)、体宽(1.0-3.5mm)、触角节数(6-7节)及气门腺数量(5-8对)
2.卵密度测定:单雌产卵量(800-1500粒/只),卵粒直径(0.3-0.4mm)
3.若虫存活率评估:初孵若虫24小时存活率(≥95%),越冬存活率(60-85%)
4.分泌物成分分析:蜜露糖分含量(葡萄糖≥65%,果糖≤30%)
5.DNA条形码检测:COI基因序列比对(目标片段658bp),ITS2区域扩增(产物长度420bp)
检测范围
1.栎属植物活体样本:包括麻栎、栓皮栎、槲栎等树种的枝条及叶片
2.木材制品:原木、板材及木制包装材料的表面残留物
3.土壤样本:树干基部半径1m范围内0-20cm土层
4.昆虫标本:博物馆馆藏标本及野外采集样本
5.进出口检疫物:苗木、接穗及果实表面附着物
检测方法
1.ISO21772:2018《植物检疫蚧虫形态鉴定技术规范》
2.GB/T35342-2017《林业有害生物检疫技术规程》第4.3节介壳虫类检测
3.ASTMD7663-12(2020)昆虫DNA提取及PCR扩增标准方法
4.GB/T38582-2020《植物有害生物分子检测通用要求》
5.SN/T1304-2018《进出境植物检疫蚧类鉴定方法》
检测设备
1.OlympusBX53研究级显微镜:配备DP27数码相机,实现500显微成像测量
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光PCR仪:支持TaqMan探针法进行特异性检测
3.MettlerToledoXS205分析天平:精度0.01mg,用于虫体称重测量
4.LeicaCM1950冷冻切片机:制备虫体横截面样本(厚度10μm)
5.BioTekSynergyH1酶标仪:测定蜜露中糖类物质吸光度值(波长490nm)
6.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机:最大转速15000rpm,用于DNA提取
7.ThermoScientificNanoDropOne紫外分光光度计:检测DNA纯度(A260/A280比值1.8-2.0)
8.MemmertIPP110培养箱:温度控制精度0.3℃,用于若虫孵化实验
9.ZeissStemi508体视显微镜:配备Axiocam208相机进行三维形态观察
10.Agilent4200TapeStation系统:进行DNA片段分析(灵敏度达0.1ng/μL)