检测项目

1.形态特征观察：孢子尺寸（8-124-6μm）、子囊盘直径（1-3cm）、菌丝直径（5-8μm）

2.分子生物学鉴定：ITS序列比对（GenBank数据库）、β-tubulin基因扩增（引物Bt2a/Bt2b）

3.生理生化特性：最适生长温度（25-30℃）、pH耐受范围（4.5-7.2）、碳源利用谱（葡萄糖/麦芽糖阳性）

4.产孢能力测定：孢子悬浮液浓度（≥110^6CFU/mL）、产孢周期（48-72h）

5.致病性测试：寄主植物侵染实验（黄瓜/番茄幼苗）、菌丝穿透力（纤维素膜降解率≥85%）

检测范围

1.农作物种子：玉米、小麦、水稻等谷物类种质资源

2.食品原料：豆类制品、干制食用菌、坚果类初加工产品

3.工业发酵菌剂：纤维素分解菌群复合制剂、有机肥发酵接种剂

4.药用植物材料：中药材原料（黄芪、当归等根茎类药材）

5.环境样本：堆肥基质、温室栽培土壤、仓储环境空气沉降物

检测方法

1.形态学鉴定：GB/T4789.15-2016《食品微生物学检验霉菌和酵母计数》附录B

2.分子生物学分析：ISO21571:2005《食品中转基因生物检测核酸提取》改良法

3.生理生化试验：ASTME2276-18《抗菌剂对真菌抑制效力的标准试验方法》

4.产孢能力测定：GB/T38581-2020《微生物培养基质量测试规程》第7章

5.致病性评价：ISO16140-3:2021《微生物学方法验证协议第3部分：参考方法修正》

检测设备

1.OlympusBX53荧光显微镜：配备DP27成像系统（400-1000显微观察）

2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（基因扩增效率≥98%）

3.MettlerToledoFE28pH计（测量精度0.01pH）

4.BeckmanCoulterMultisizer4e颗粒计数器（0.4-1600μm粒径分析）

5.MemmertHPP750恒温恒湿培养箱（温度波动0.3℃，湿度控制2%）

6.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪（代谢产物定量限0.1μg/mL）

7.SartoriusSecura225D-1CN电子天平（称量精度0.1mg）

8.BioTekSynergyH1酶标仪（吸光度测量范围0-4OD）

9.EppendorfCentrifuge5910R高速离心机（最大转速21,130g）

10.ESCOAC2-4S1生物安全柜（洁净度ISOClass5级）