检测项目

1.IgM/IgG抗体检测：采用ELISA法测定血清特异性抗体效价（OD值≥0.5判为阳性）

2.病毒RNA核酸检测：RT-qPCR法测定Ct值≤38判定为阳性

3.抗原蛋白检测：免疫荧光法检测组织样本中NSs蛋白表达量≥50IU/mL

4.中和抗体效价测定：空斑减少中和试验（PRNT）效价≥1:40为阳性

5.病毒分离培养：VeroE6细胞系培养观察CPE效应（≥70%细胞病变）

检测范围

1.动物血清样本：牛、羊等易感动物的血清抗体筛查

2.组织病理样本：肝脏、脾脏等器官的病毒载量分析

3.媒介生物样本：伊蚊、库蚊等蚊虫体内病毒分离

4.环境样本：疫区土壤、水体中的病毒RNA残留检测

5.疫苗产品：灭活疫苗的抗原含量（≥2.5μg/mL）及效力验证

检测方法

1.ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》血清学检测规范

2.GB/T19438.2-2004《禽流感病毒RT-PCR检测方法》改良版用于病毒核酸检测

3.ASTME2888-19《病毒中和试验标准指南》指导中和抗体测定

4.WHO《裂谷热实验室诊断手册》推荐的免疫荧光抗原检测流程

5.GB17025-2017《实验室生物安全通用要求》BSL-3实验室操作规范

检测设备

1.ABI7500实时荧光定量PCR仪：用于病毒RNA定量分析（灵敏度0.1拷贝/μL）

2.BioTekELx808酶标仪：执行ELISA试验（波长范围400-750nm）

3.Eppendorf5424R高速冷冻离心机：处理生物样本（最大转速15,000rpm）

4.ThermoScientificMultiskanSky全波长分光光度计：核酸浓度测定（A260/A280比值1.8-2.0）

5.EscoAirstreamACB-4E0生物安全柜：提供ClassIIB2型防护（风速0.45m/s20%）

6.OlympusIX73倒置荧光显微镜：观察细胞病变效应（400放大倍率）

7.SartoriusCubisII精密天平：称量试剂（精度0.0001g）

8.MemmertINCOmed细胞培养箱：维持37℃/5%CO₂培养环境（温度波动0.3℃）

9.HamiltonMICROLABSTARlet液体工作站：自动化加样（精度1%）

10.PanasonicMDF-U53V超低温冰箱：保存生物样本（-80℃3℃）