检测项目

1.病原菌分离培养：采用PDA培养基（pH5.60.2），28℃暗培养72小时观察菌落形态

2.核酸浓度测定：使用Qubit4.0测定DNA纯度（OD260/280≥1.8）及浓度（≥20ng/μL）

3.ITS序列扩增：引物ITS1/ITS4扩增500-700bp片段（退火温度551℃）

4.木质素含量测定：硫代硫酸钠法测定样本木质素占比（精度0.05%）

5.维管束显微观察：石蜡切片厚度8μm（LeicaRM2235切片机），400倍镜检

检测范围

1.茄科作物（番茄/辣椒/茄子）茎基部维管束样本

2.豆科植物（大豆/蚕豆）根系腐烂组织

3.蔷薇科果树（苹果/梨树）枝干溃疡斑块

4.禾本科作物（玉米/小麦）叶鞘褐变组织

5.林木类（松树/杉木）韧皮部坏死样本

检测方法

1.ISO16140-3:2022《分子生物学方法验证规范》用于病原菌核酸检测

2.GB/T28068-2011《植物病原真菌分离培养技术规程》指导菌株纯化

3.ASTMD7468-22《植物组织核酸提取标准方法》规范DNA制备流程

4.GB/T3543.5-2023《农作物种子检验规程》适用于种子带菌率测定

5.ISO21527-2:2020《真菌毒素检测技术》用于次生代谢产物分析

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪（病原菌核酸检测）

2.LeicaDM750生物显微镜（400倍显微观察配备LASV4.12图像系统）

3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机（最大转速30,000rpm）

4.MemmertIPP110恒温培养箱（温度控制精度0.3℃）

5.SartoriusQuintix224-1CN分析天平（称量精度0.1mg）

6.BioTekSynergyH1酶标仪（波长范围200-999nm）

7.MilestoneETHOSUP微波消解仪（40位转子容量）

8.Agilent1260InfinityIIHPLC系统（色谱柱ZORBAXSB-C18）

9.OlympusBX53荧光显微镜（配备DP80双摄像头系统）

10.LabconcoFreeZone2.5L冷冻干燥机（冷阱温度-84℃）