检测项目

1.病原分离鉴定：包括细菌形态学观察（革兰氏阴性短杆菌）、生化反应（氧化酶阳性、过氧化氢酶阳性）及API20NE系统鉴定

2.血清型分型：采用Carter-Heddleston分型系统测定荚膜抗原（A/B/D/E/F型）和体抗原（1-16型）

3.毒力基因检测：PCR扩增toxA、ompH、ptfA基因（引物序列：toxA-F:5'-ATGACCAAGCTCAAGCCG-3'）

4.抗生素敏感性试验：CLSIM45-A3标准测试β-内酰胺类（MIC≤0.12μg/mL）、氟喹诺酮类（MIC≤0.5μg/mL）等12类抗生素

5.组织病理学检查：HE染色观察肝脾坏死灶（直径0.5-2mm）、血管内纤维素性血栓形成

检测范围

1.活禽样本：鸡/鸭/鹅口腔拭子（含菌量≥10^3CFU/mL）、泄殖腔拭子

2.组织样本：肝脏（坏死灶直径≥1mm）、脾脏、肺脏（湿重≥5g）

3.环境样本：饮水系统（需过滤浓缩100mL水样）、笼具表面擦拭物（面积1010cm）

4.疫苗产品：灭活疫苗抗原含量（≥510^8CFU/mL）、弱毒疫苗残余毒力测试

5.饲料添加剂：杆菌肽锌（检测限0.5ppm）、恩诺沙星（HPLC定量限0.01μg/g）

检测方法

ISO10272-1:2017《食品链微生物学-水平法-第1部分：多杀性巴氏杆菌的检测》

GB/T14926.52-2001《实验动物微生物学检验方法-多杀性巴氏杆菌检验》

ASTMF2315-18《动物源性食品中巴氏杆菌属的实时荧光PCR检测》

OIE《陆生动物诊断试验手册》第3.4.12章（间接血凝试验IHA≥1:16判阳性）

NY/T563-2016《禽霍乱诊断技术》（环介导等温扩增法LAMP）

检测设备

1.BACTECFX40全自动血培养系统：支持需氧/厌氧双模式培养（检出限1CFU/mL）

2.BioMrieuxVITEK2Compact：完成GN卡32项生化鉴定（准确率≥95%）

3.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪：支持TaqMan探针法（灵敏度10copies/μL）

4.OlympusBX53荧光显微镜：100油镜观察吖啶橙染色菌体（检出限10^4CFU/g）

5.BiotekELx808酶标仪：完成间接ELISA抗体效价测定（OD450nm值0.01精度）

6.MaldiBiotyper质谱仪：获得特征峰m/z3000-15000的蛋白质指纹图谱

7.SartoriusMD8空气采样器：采集气溶胶样本（流速50L/min5%）

8.ThermoScientificHeratherm微生物培养箱：维持37℃0.5℃恒温环境

9.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：色谱柱ZORBAXSB-C18（4.6250mm,5μm）

10.LeicaCM1950冰冻切片机：制备5μm厚组织切片（温度-20℃1℃）