检测项目
1.直接镜检：采用10%KOH溶液处理样本后观察菌丝/孢子形态（400光学显微镜）
2.真菌培养：接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA），28℃培养2-4周
3.分子生物学检测：PCR扩增ITS区域（引物ITS1/ITS4），测序比对GenBank数据库
4.药敏试验：微量稀释法测定MIC值（特比萘芬0.03-16μg/mL）
5.乳酸酚棉蓝染色：观察分生孢子结构（1000油镜）
检测范围
1.皮屑样本：足底鳞屑型/水疱型病变表皮组织
2.甲屑样本：甲板远端侧缘下碎屑（厚度≤0.5mm）
3.水疱液：未破裂水疱无菌穿刺采集浆液
4.趾间浸渍样本：糜烂面刮取物（需避开坏死组织）
5.毛发根部：拔取病发毛根进行伍德灯筛查
检测方法
ISO21527-1:2008真菌分离培养技术规范
CLSIM38-A2丝状真菌药敏试验标准
GB/T14926.64-2012实验动物真菌检测方法
WS/T497-2017侵袭性真菌病临床实验室诊断操作指南
ASTME2149-2013a抗真菌活性定量测定方法
检测设备
OlympusCX43生物显微镜：配备相差增强器（PHC）观察菌丝结构
Bio-RadT100PCR仪：支持梯度PCR程序（退火温度52-60℃）
ThermoScientificHeracell150iCO₂培养箱：温度波动0.5℃
SensititreYeastOneYO10板：包含9种抗真菌药物浓度梯度
IlluminaMiSeq测序平台：PE300模式进行ITS序列分析
BioscreenC全自动生长曲线分析仪：监测真菌生长速率
梅里埃VITEKMS质谱仪：MALDI-TOF技术快速鉴定菌种
ESCOClassII生物安全柜：达到ISO14644-1Class5标准
METTLERTOLEDOXSR205电子天平：称量精度0.01mg配制培养基
MemmertIN55恒温干燥箱：玻璃器皿灭菌程序（180℃2h）