检测项目
1.形态特征检测:体长3.5-4.8mm,鞘翅黑色边缘宽度0.15-0.25mm,前胸背板红斑直径0.3-0.5mm
2.线粒体COI基因序列分析:目标片段658bp,比对NCBI数据库相似度≥98%
3.共生微生物筛查:Wolbachia菌株16SrRNA基因扩增(引物wsp-F:5'-TGGTCCAATAAGTGATGAAGAAAC-3')
4.捕食能力评估:日平均蚜虫捕食量(25℃下≥45头/24h)
5.抗药性测试:对拟除虫菊酯类农药LC50值测定(浓度梯度0-200mg/L)
检测范围
1.农林生态系统采集的瓢虫活体样本
2.进出口植物检疫中的昆虫卵块及幼虫标本
3.生物防治制剂中的瓢虫成虫冻干粉
4.环境DNA样本(eDNA过滤膜片)
5.博物馆昆虫标本馆藏标本(1890年后采集个体)
检测方法
1.GB/T31748-2015《瓢虫科昆虫形态鉴定技术规范》
2.ISO21571:2005《食品与动物饲料的微生物检测核酸提取方法》
3.ASTME2456-06(2020)《昆虫抗药性生物测定标准指南》
4.GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定》显微切片法
5.ISO/IEC17025:2017《检测和校准实验室能力通用要求》
检测设备
1.NikonSMZ25体视显微镜(放大倍率8x-200x,NIS-Elements成像系统)
2.IlluminaNovaSeq6000基因测序仪(双通道S4流动槽,单次输出6Tb数据)
3.ThermoFisherQuantStudio7Pro实时荧光定量PCR仪(支持TaqMan探针检测)
4.MettlerToledoXSR205DU分析天平(量程220g,精度0.01mg)
5.LeicaCM1950冷冻切片机(切片厚度1-100μm温控范围-50℃至0℃)
6.Agilent7890B气相色谱仪(配备FID检测器,农药残留分析)
7.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(最大转速30,000rpm)
8.OlympusBX53荧光显微镜(配备DP80双摄像头系统)
9.MemmertIPP110恒温培养箱(温度范围0-70℃,湿度控制1%RH)
10.SartoriusBiostatB发酵罐(用于大规模昆虫病原菌培养)