检测项目
1.菌丝形态学特征:测量菌丝直径(3-8μm)、附着胞形态(球形/椭圆形)、分生孢子梗长度(80-150μm)
2.分生孢子参数:统计分生孢子尺寸(25-4512-22μm)、链生孢子数量(3-10个/链)、表面纹饰特征
3.rDNAITS序列分析:比对18SrRNA基因(约600bp)、ITS1-5.8S-ITS2区域(450-650bp)
4.致病性测试:接种浓度(110^5conidia/mL)、潜育期(7-14天)、病斑扩展速率(mm/day)
5.次生代谢产物检测:三萜类化合物含量(HPLC法)、麦角固醇浓度(GC-MS法)
检测范围
1.农作物样本:小麦叶片、葡萄果实、黄瓜茎秆等植物组织
2.环境样本:温室空气沉降物、土壤浸出液、灌溉水样
3.食品原料:干制果蔬表面附着物、谷物加工残留物
4.生物制剂:微生物肥料、植物促生菌剂中的污染菌筛查
5.科研材料:真菌保藏菌株的复核鉴定与质量控制
检测方法
1.ISO21527-2:2008《真菌分离与鉴定技术规范》
2.ASTMD7652-11(2020)《空气样本中真菌孢子采集与计数标准》
3.GB/T32720-2016《植物病原菌分子检测通用要求》
4.GB/T38581-2020《微生物生物量测定ATP生物发光法》
5.SN/T5364.3-2021《出口植物及其产品白粉病菌检疫鉴定方法》
检测设备
1.OlympusBX53显微镜:配备DP27数码相机,实现400-1000显微观察与图像分析
2.ThermoNanoDrop2000分光光度计:测定DNA纯度(A260/A280比值1.8-2.0)
3.Bio-RadT100PCR仪:支持梯度PCR程序(退火温度45-65℃)
4.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:色谱柱ZORBAXEclipseXDB-C18(4.6150mm,5μm)
5.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:检测灵敏度达10copies/μL
6.SartoriusMCA微生物气溶胶采样器:流量28.3L/min,粒径截留0.65μm以上颗粒
7.MemmertICP600培养箱:温度控制精度0.3℃,湿度范围30-95%RH
8.IlluminaMiSeq测序平台:PE300模式读取ITS序列数据
9.LeicaCM1950冷冻切片机:制备10μm厚度的植物组织切片
10.ShimadzuGCMS-QP2020NX系统:EI离子源温度230℃,扫描范围m/z40-600