检测项目

1.尿黑酸（HomogentisicAcid）浓度测定：采用高效液相色谱法（HPLC），定量范围0.5-200mg/L，检出限0.1mg/L。

2.HGD基因全外显子测序：覆盖9个外显子及剪接区域，突变检出率≥99%。

3.肝功能指标分析：包括ALT（5-40U/L）、AST（8-40U/L）、总胆红素（3.4-20.5μmol/L）。

4.尿液褐黄素沉积检测：紫外分光光度法（波长280nm），半定量分级（0-4+）。

5.关节液成分分析：焦磷酸钙晶体鉴定（偏振光显微镜），蛋白含量（15-30g/L）。

检测范围

1.晨尿样本：需采集连续3天晨间中段尿样（10mL/次），避光保存于-20℃。

2.EDTA抗凝全血：用于HGD基因测序（采血量≥3mL）。

3.滑膜活检组织：石蜡包埋切片厚度4μm，HE染色观察色素沉积。

4.关节软骨样本：傅里叶变换红外光谱（FTIR）分析胶原纤维变性程度。

5.新生儿足跟血滤纸片：用于质谱法筛查尿黑酸代谢产物。

检测方法

1.ISO15197:2013《体外诊断系统-尿液生化分析技术要求》

2.ASTME2674-09《临床质谱法测定小分子代谢物标准指南》

3.GB/T37864-2019《生物样本中基因突变检测高通量测序通用标准》

4.WS/T404.5-2015《临床化学检验基本技术标准第5部分：液相色谱法》

5.YY/T1453-2016《医用离心机核酸提取试剂盒质量评价标准》

检测设备

1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备DAD检测器（190-950nm），用于尿黑酸定量分析。

2.IlluminaNovaSeq6000测序仪：通量20-48samples/run，读长2150bp。

3.ThermoFisherQExactiveHF-X质谱仪：分辨率240,000FWHM，质量精度<3ppm。

4.OlympusBX53偏振光显微镜：配置U-AN360P检偏器组，放大倍数40-1000。

5.PerkinElmerLambda365UV-Vis分光光度计：波长范围190-1100nm，带宽0.5-5nm可调。

6.EppendorfCentrifuge5430R：最大转速15,000rpm，温控范围-10℃至40℃。

7.RocheCobasc501生化分析仪：支持ALT/AST等肝功能指标自动化检测。

8.LeicaCM1950冷冻切片机：切片厚度1-100μm，温控精度1℃。

9.BrukerVertex70FTIR光谱仪：光谱范围7,800-350cm⁻，分辨率≤0.4cm⁻。

10.AppliedBiosystems7500Real-TimePCR系统：支持TaqMan探针法基因分型。